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溪儿维娅

铜虫 (小有名气)

[交流] 关于克隆的假阳性

我最近做的克隆转化,平板上隔夜都会长出单克隆,但是为什么每次都提不到质粒呢?我也用氯霉素扩增质粒的方法了,但还是提不出来。我咨询过老师和同学,他们有的回答,可能我的平板上长出来的都是假阳性。
     不知道究竟是怎么回事。那位高人能不能帮我分析一下啊。谢谢啦

[ Last edited by amisking on 2009-11-21 at 16:36 ]
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
要先验证是不是阳性菌落,如果是的话再抽质粒。
5楼2009-11-22 00:33:09
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龙井茶室

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lz说的比较简单
你最好说下你的感受态是什么(DH5a?),质粒用的是什么,什么抗性(cm吗?),
单克隆的数量多少(>100)?
假阳性一般都是连的小片段,建议切胶回收再连
2楼2009-11-21 01:13:59
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09021122

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
同意二楼的观点,你用的感受态是什么,质粒有是什么?
最好是割胶回收分析。也有可能不是假阳性呢?
雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
3楼2009-11-21 08:04:01
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cecilia801537

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lz的问题是提不出质粒来 可能是你的平板忘加抗生素了?
专业提供出国咨询、翻译服务 http://techlever.taobao.com QQ: 1056463777
4楼2009-11-22 00:28:07
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