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墨焰

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】sds-page蛋白电泳 已有4人参与

大家好,初做蛋白电泳,有很多不明白的,请大家帮忙指点一下,非常感谢!
这是最近跑的电泳图,跑了几次,效果都是这样,不是很明白问题出在哪里,请大家帮忙。
电泳用的10%和3%的胶
每次溴酚兰跑到最下边的时候,蛋白条带都聚集在上部,感觉溴酚蓝不能指示蛋白所处的位置,然后就是蛋白条带都分不开,Marker 也分不开,最下边亮亮的条带是蛋白(⊙_⊙)?完全不明白是怎么回事怎么改正,请各位高手帮忙指点一下!谢谢!
2道是Marker

[ Last edited by 350784478 on 2009-12-2 at 14:31 ]
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gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师

★
lstt09nk(金币+1):欢迎交流~~ 2010-04-19 18:59
明显看出样品制备和制胶都存在一定问题!另外我不知道你跑的是什么蛋白样品?要是蛋白分子量也出现同样问题,那么你的主要问题应该出在制备蛋白电泳胶上,要重新配制你的电泳胶所有相关溶液,pH要准确调整!
大家共同交流、共同提高!!!
3楼2010-04-19 16:27:15
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jingjing3256

铜虫 (初入文坛)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的问题解决了吗?我的marker也是这种情况呢,愁~~
2楼2010-04-19 15:48:56
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 2010-04-21 11:26
你的电泳胶制备液 可能有问题。

不信,可以拿自己的样品到别的实验室里 让别人带个样。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2010-04-19 18:30:51
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guoenwen

金虫 (小有名气)

★
amisking(金币+1): 2010-04-21 11:26
先保证药品没有问题,然后操作是按照通用步骤做的,样品点样之前要离心,最后不行就让别人带一次。看到底问题出哪里去了。
5楼2010-04-20 19:49:29
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