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woxinfeiyang

木虫 (正式写手)

[交流] 凯氏定氮测定标准蛋白称样量多少?

大家用凯氏定氮的方法测定标准蛋白的浓度,需要多大的称样量啊!往高手回复,非常感谢!
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cato8163

银虫 (正式写手)

★ ★
woxinfeiyang(金币+2,VIP+0):谢谢,我的样品蛋白浓度不但小,我把蛋白沉淀出来加水溶解测定,我怕由于加水了硫酸浓度不够,所以就多加了两倍的硫酸,是不是硫酸浓度加的太多了 11-23 11:20
引用回帖:
Originally posted by woxinfeiyang at 2009-11-22 00:21:
谢谢各位的回复,我主要是想用凯氏定氮的方法验证我做的其他方法的正确型!我的样品中含蛋白量很小,大约有0.1%左右,但样品含氮;我用约同样浓度的标准蛋白直接用凯氏定氮仪测定,但测定不到蛋白,是不是浓度太低 ...

关于硼酸不变色,小可做实验用空白,也是变色的,只是颜色变的时间慢。
看到你的蛋白含量非常少,你看一下凯氏定氮法的说明吧,我个人认为这样低的含量,是不可以测的。空白的滴定也要0.1mL左右。按照推算,如果滴定时,结果是2mL,那你的称量质量是:17000g左右,你觉得可能吗?
小可,只是建议。
9楼2009-11-23 10:42:39
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woxinfeiyang

木虫 (正式写手)

我实验室有一个凯氏定氮仪,想测一下样品中蛋白的浓度,用标准蛋白来验证,大家有做凯氏定氮确定标准蛋白的浓度的吗?往高手指点!
2楼2009-11-20 15:12:00
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hbwang6391

木虫 (著名写手)

忽忽家族觉糖主

★ ★
1949stone(金币+1,VIP+0):同意 11-21 15:07
woxinfeiyang(金币+1,VIP+0):谢谢,可我的样品含氮并且含蛋白浓度太低(约0.1%),我想将蛋白沉淀出来再用凯氏定氮进行测定,从而算出浓度,后再验证用其他方法测定的准确性。 11-22 00:24
没有测定过标准蛋白的,但根据经验,我感觉你应该要把样品稀释到一定程度,要不然的话,蛋白含量太高你滴定的时候会非常麻烦,具体稀释到多少要看你是微量测定还是常量测定了
笑笑别人,让别人笑笑,笑笑自己
3楼2009-11-20 20:10:11
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helingling

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0):同意 11-21 15:06
woxinfeiyang(金币+2,VIP+0):谢谢,我的浓度可能太低了,我的大概是微克级别的。 11-22 00:25
采用常量法操作,取样量为相当于含氮量25-30mg,含氮量*6.25=蛋白质含量
采用半微量法,取样量为相当于含氮量1.0-2.0mg
4楼2009-11-20 22:59:20
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