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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 凯氏定氮测定标准蛋白称样量多少？
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woxinfeiyang

木虫 (正式写手)

[交流] 凯氏定氮测定标准蛋白称样量多少？

大家用凯氏定氮的方法测定标准蛋白的浓度，需要多大的称样量啊！往高手回复，非常感谢！
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1楼 2009-11-20 15:07:58
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cato8163

银虫 (正式写手)
★ ★
woxinfeiyang(金币+2,VIP+0):谢谢，我的样品蛋白浓度不但小，我把蛋白沉淀出来加水溶解测定，我怕由于加水了硫酸浓度不够，所以就多加了两倍的硫酸，是不是硫酸浓度加的太多了 11-23 11:20
引用回帖:
Originally posted by woxinfeiyang at 2009-11-22 00:21:
谢谢各位的回复，我主要是想用凯氏定氮的方法验证我做的其他方法的正确型！我的样品中含蛋白量很小，大约有0.1%左右，但样品含氮；我用约同样浓度的标准蛋白直接用凯氏定氮仪测定，但测定不到蛋白，是不是浓度太低 ...

关于硼酸不变色，小可做实验用空白，也是变色的，只是颜色变的时间慢。
看到你的蛋白含量非常少，你看一下凯氏定氮法的说明吧，我个人认为这样低的含量，是不可以测的。空白的滴定也要0.1mL左右。按照推算，如果滴定时，结果是2mL，那你的称量质量是：17000g左右，你觉得可能吗？
小可，只是建议。
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9楼2009-11-23 10:42:39
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查看全部 17 个回答

woxinfeiyang

木虫 (正式写手)
我实验室有一个凯氏定氮仪，想测一下样品中蛋白的浓度，用标准蛋白来验证，大家有做凯氏定氮确定标准蛋白的浓度的吗？往高手指点！
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2楼2009-11-20 15:12:00
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hbwang6391

木虫 (著名写手)

忽忽家族觉糖主
★ ★
1949stone(金币+1,VIP+0):同意 11-21 15:07
woxinfeiyang(金币+1,VIP+0):谢谢，可我的样品含氮并且含蛋白浓度太低（约0.1%），我想将蛋白沉淀出来再用凯氏定氮进行测定，从而算出浓度，后再验证用其他方法测定的准确性。 11-22 00:24
没有测定过标准蛋白的，但根据经验，我感觉你应该要把样品稀释到一定程度，要不然的话，蛋白含量太高你滴定的时候会非常麻烦，具体稀释到多少要看你是微量测定还是常量测定了
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笑笑别人，让别人笑笑，笑笑自己
3楼2009-11-20 20:10:11
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helingling

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0):同意 11-21 15:06
woxinfeiyang(金币+2,VIP+0):谢谢，我的浓度可能太低了，我的大概是微克级别的。 11-22 00:25
采用常量法操作，取样量为相当于含氮量25-30mg，含氮量*6.25=蛋白质含量
采用半微量法，取样量为相当于含氮量1.0-2.0mg
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4楼2009-11-20 22:59:20
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