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汕头大学海洋科学接受调剂
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xinrui_309

新虫 (小有名气)

[交流] 配制非变性PAGE5%浓缩胶,无法凝固,是什么原因?

我参照书上的公式算好了,但是胶凝结不住,一直是略带粘性的液体,加TEMED也不行,不知道问题出在哪里?溶液也重新配了,还是那样。谁知道问题在哪里?
我的配法是:溶液A:30g丙烯酰胺,0.8g双丙烯酰胺,加蒸馏水至100ml,搅拌至完全溶解。
溶液C:6.0gTris溶于40ml蒸馏水,加盐酸至PH6.8,加蒸馏水至100ml。
配4ml  5%浓缩胶的:A液0.65ml,C液1.0ml,蒸馏水2.3ml,10%AP 30ul,TEMED 5ul
请哪位大侠帮看看问题出在哪里?
另外,分离胶有点软,是什么问题?
谁能提供详细的非变性的PAGE 10%分离胶和5%浓缩胶的配方?
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anik

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
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1949stone(金币+2,VIP+0):maybe 11-22 21:05
APS放置时间是否过长?
苔黑酚(?)是否被氧化?
3楼2009-11-19 21:56:54
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小小豆豆

金虫 (小有名气)


1949stone(金币+1,VIP+0): 11-22 21:05
加tbe了吗,没见你写啊

[ Last edited by 小小豆豆 on 2009-11-19 at 21:17 ]
2楼2009-11-19 21:13:29
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star1987

木虫 (著名写手)

笑傲江湖

★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0):谢谢分享经验 11-22 21:05
还有一个可能就是你配完胶之后没有摇匀,导致下面的胶凝了,而上面的很稀凝不住,我以前就遇到这种情况。
5楼2009-11-20 10:47:02
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wccc

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+0,VIP+0):同意 11-22 21:05
胶不凝主要考虑两个试剂,APS与TEMED.
APS是否潮解?
TEMED是否过期?
还可以尝试逐步加大TEMED的量。
6楼2009-11-22 20:27:31
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