应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【交流/求助】关于5‘-RACE和3’-RACE的问题
汕头大学海洋科学接受调剂
51/1返回列表
查看: 2873  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

pidou

木虫 (正式写手)

[交流] 【交流/求助】关于5‘-RACE和3’-RACE的问题

1、在获取cDNA全长的时候，5‘-RACE和3’-RACE都是以mRNA为模板，还是以第一链cDNA为模板的呢？？
2、在获取cDNA全长的时候，5‘-RACE和3’-RACE都要使用呢？？还是只使用一种技术就可以了呢？？

期待高手的答复，希望回复的详细一点，谢谢，在线等....

[ Last edited by amisking on 2009-12-23 at 12:22 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-11-19 10:57:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2009-11-19 11:04:
不管3还是5都要mRNA做模板的，先逆转录第一链即可，然后用第一链做RACE。获得CDNA全长肯定要两断都要做了！个人认为3RACE容易出啦，因为你有polyA锚定引物。5RACE一般很难做出完整的5端上游序列，即使用试剂盒。但 ...

1、可是第一链cDNA是mRNA的完全克隆吗？？那用反转录酶多克隆点，再测序不就知道cDNA的序列了吗？？
2、5‘-和3’-RACE都做完后，怎么即将这两个连接成一条完整的cDNA 呢？？
赞一下 回复此楼
5楼2009-11-19 11:41:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

liyong1981

金虫 (正式写手)
★
pidou(金币+1,VIP+0):希望高手继续相助 11-19 11:41
不管3还是5都要mRNA做模板的，先逆转录第一链即可，然后用第一链做RACE。获得CDNA全长肯定要两断都要做了！个人认为3RACE容易出啦，因为你有polyA锚定引物。5RACE一般很难做出完整的5端上游序列，即使用试剂盒。但扩出你需要的ORF一半冒得问题。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-11-19 11:04:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
或者送公司做，RACE传统的方法做，很折磨人~
赞一下 回复此楼
3楼2009-11-19 11:05:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小白3521

金虫 (小有名气)
我的3‘和5’race用的takara的试剂盒，3’比较好做一点，步骤也比较少，5‘复杂一些，都需要用RNA转录成带有试剂盒中的接头引物的cDNA，再P，然后用你获得的5’和3’序列拼接成你的全序列，设计引物，在普通的cDNA中扩全长基因
赞一下 回复此楼
4楼2009-11-19 11:13:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 机械还有还有名额吗？太难了 +8 笑笑袁 2026-04-10 8/400 2026-04-14 08:44 by screening
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 302求调剂 +10 易！? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
[考研] 335求调剂 +18 想上岸呀！！ 2026-04-12 19/950 2026-04-13 14:15 by 张zhihao
[考研] 生物学调剂，一志愿西南大学348，Top期刊一区二作、二区三作，三等奖学金三次 +5 candyyyi 2026-04-09 5/250 2026-04-13 09:02 by 可淡不可忘
[考研] 一志愿中国科学院上海有机所，有机化学356分找调剂 +12 Nadiums 2026-04-09 12/600 2026-04-13 08:50 by lhj2009
[考研] 346分，工科0854求调剂，专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[考研] 材料与化工300求调剂 +39 肖开文 2026-04-09 43/2150 2026-04-12 01:30 by 秋豆菜芽
[考研] 299求调剂 +8 ZVVZ13 2026-04-08 8/400 2026-04-12 00:40 by 蓝云思雨
[考研] 280求调剂 +7 兮兮夜夜 2026-04-09 10/500 2026-04-12 00:33 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +6 电气300求调剂不 2026-04-08 6/300 2026-04-11 20:14 by 逆水乘风
[考研] 085400 328分 求调剂 +10 喂你一个大橙子 2026-04-09 14/700 2026-04-11 19:53 by lqspecial
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考研] 材料与化工调剂 +12 否极泰来2026 2026-04-10 13/650 2026-04-11 00:28 by wangjihu
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 一志愿中科大070300化学，314分求调剂 +12 wakeluofu 2026-04-09 12/600 2026-04-10 09:57 by liuhuiying09
[考研] 本科西工大 0856 324求调剂 +10 wysyjs25 2026-04-09 11/550 2026-04-10 08:37 by 5268321
[考博] 博士自荐 +7 可可小胖 2026-04-08 7/350 2026-04-10 08:28 by kimhero
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 一志愿西南大学生物学学硕344 求生物学相关调剂/生物与医药 +7 超人不会飞@ 2026-04-08 7/350 2026-04-09 09:35 by gong120082
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭