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anik

银虫 (正式写手)


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引用回帖:
Originally posted by grief at 2009-11-19 15:27:
如果你的菌不是低拷贝,那么就是试剂盒回收效率的问题了。
我们实验室提取质粒也是用试剂盒。一般我们摇菌时抗性的浓度会稍微多加点,在抗性的压力下,如果过夜摇菌的话,菌中的质粒就不会减少太多。一般是提取3 ...

洗脱用20ul完全可以。。。
11楼2009-11-19 21:51:36
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qingfengwu

金虫 (小有名气)

takara就OK

★ ★ ★ ★ ★
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amisking(金币+4,VIP+0): 11-19 22:04
takara的酶已经很好了,尽量用takara的酶。因为这个公司在国内都有现货,到货非常快。ferment订个酶都要很久。因此尽量实验室的常规酶都用takara的。

另外,BSA不一定要加,根据takara说明书上的进行,有些需要BSA,有些根本不需要。

双酶切时,质粒的量浓度要测好,1-2 ug是需要的。
也不需要太长时间,有些酶比较差,比如XbaI和BamHI双酶切时候就会需要很长时间才能切得好。
12楼2009-11-19 21:58:24
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Charlie1331

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个要看用什么酶以及什么Buffer等
13楼2009-11-19 22:20:42
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