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anik

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引用回帖:

Originally posted by grief at 2009-11-19 15:27:
如果你的菌不是低拷贝，那么就是试剂盒回收效率的问题了。
我们实验室提取质粒也是用试剂盒。一般我们摇菌时抗性的浓度会稍微多加点，在抗性的压力下，如果过夜摇菌的话，菌中的质粒就不会减少太多。一般是提取3 ...

洗脱用20ul完全可以。。。

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11楼2009-11-19 21:51:36

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qingfengwu

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takara就OK

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amisking(金币+4,VIP+0): 11-19 22:04

takara的酶已经很好了，尽量用takara的酶。因为这个公司在国内都有现货，到货非常快。ferment订个酶都要很久。因此尽量实验室的常规酶都用takara的。

另外，BSA不一定要加，根据takara说明书上的进行，有些需要BSA，有些根本不需要。

双酶切时，质粒的量浓度要测好，1－2 ug是需要的。
也不需要太长时间，有些酶比较差，比如XbaI和BamHI双酶切时候就会需要很长时间才能切得好。

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12楼2009-11-19 21:58:24

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Charlie1331

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这个要看用什么酶以及什么Buffer等

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13楼2009-11-19 22:20:42

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