24小时热门版块排行榜    

查看: 927  |  回复: 6
当前主题已经存档。

wangjinna

银虫 (正式写手)

[交流] PCR电泳出现空白条带,帮忙分析

我的目的基因300多bp,PCR后进行电泳,结果在小于100bp处,模板DNA和空白均出现了很亮的条带,目的基因却没有跑出来。
我用的简并引物,两条引物的兼并性均为64.
PCR条件:94  4min,94  1min,44  40s,72  40s,72  10min
请大家帮忙分析下
回复此楼
贝姬任何打击都熄灭不了的热情
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

09021122

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
空白处怎么会出现条带呢 是不是点样时出现了错误。
你那退火温度是不是要变一下!
雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
2楼2009-11-17 20:01:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzw1221

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
退火温度太低了吧,44度,好像很少用到这么低的温度的
3楼2009-11-17 20:21:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gynan123

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
350784478(金币+1,VIP+0): 11-17 21:05
我觉得有两种可能,一是是否含有其他杂质污染,二是引物二聚体的条带。建议重新设计引物
4楼2009-11-17 20:22:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smurfen

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
350784478(金币+1,VIP+0): 11-17 21:06
肯定是引物二聚体啦
简并引物扩不出东西很正常吧
重新设计引物呗
Advances in Prevention of Thermal Runaway in Lithium-Ion Batteries
5楼2009-11-17 20:26:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

350784478

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by gynan123 at 2009/11/17 20:22:
我觉得有两种可能,一是是否含有其他杂质污染,二是引物二聚体的条带。建议重新设计引物

基本上同意他的说法,要是你的CDNA没有问题的话,那你就找找上面的原因,你可以先用别人已经跑成熟的内参来试一下。
朝为田舍郎,暮登天子堂。将相本无种,男儿当自强。
6楼2009-11-17 21:06:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lulu-yaqi

金虫 (小有名气)

引物特异性不好
相信自己
7楼2009-11-17 22:16:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wangjinna 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +11 医学老男孩 2026-08-13 29/1450 2026-08-14 00:04 by 大快人心啦
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 28/1400 2026-08-13 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
信息提示
请填处理意见