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dapaosheng

木虫 (著名写手)

[交流] PET载体诱导蛋白

我用pet-32a(+)载体来诱导表达一个抗体分子,构建好的重组载体(即插入了我的目的片段的pet-32a(+))经过PCR和酶切检验,确认片段已经插入到载体中,但诱导表达后经过SDS-PAGE凝胶电泳发现与空载体pet-32a(+)诱导的结果一样,只是在大约21kD左右的位置有一条很粗的带,这是为什么呢?我用的酶切位点是EcoR I和Sal I,插入的片段有729bp,计算过诱导出的重组蛋白应该大约在47~48kD的位置才对,但在那个位置就是没有看到比空载体pet-32a(+)更粗的带,不知道是为什么呢,请各位高手指教一下!
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thinka

铜虫 (著名写手)


dapaosheng(金币+1,VIP+0):0 12-25 13:34
重组质粒应该测序的
4楼2009-12-24 20:06:26
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smurfen

至尊木虫 (著名写手)

提前终止了?引物没设计好?
找个软件分析一下重组质粒波
Advances in Prevention of Thermal Runaway in Lithium-Ion Batteries
2楼2009-11-16 21:26:06
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2004371310

木虫 (著名写手)

你的阅读框有没有对好啊?我觉得你应该没对好阅读框,再仔细看看吧
3楼2009-12-24 17:06:14
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