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dapaosheng木虫 (著名写手)
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PET载体诱导蛋白
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| 我用pet-32a(+)载体来诱导表达一个抗体分子，构建好的重组载体（即插入了我的目的片段的pet-32a(+)）经过PCR和酶切检验，确认片段已经插入到载体中，但诱导表达后经过SDS-PAGE凝胶电泳发现与空载体pet-32a(+)诱导的结果一样，只是在大约21kD左右的位置有一条很粗的带，这是为什么呢？我用的酶切位点是EcoR I和Sal I，插入的片段有729bp，计算过诱导出的重组蛋白应该大约在47~48kD的位置才对，但在那个位置就是没有看到比空载体pet-32a(+)更粗的带，不知道是为什么呢，请各位高手指教一下！ |
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