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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】请问样品在色谱柱上没有保留怎么办
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dzywell

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】请问样品在色谱柱上没有保留怎么办

请各位高手帮忙分析一下，本来色谱柱一直好好的，三个对照品在10min-20min出峰，可两天后再继续做的时候发现， 我的对照品全在2min-5min累积出峰了，换了其他的对照品全是这种情况，是色谱柱没有保留了吗？怎么造成的？应该怎么办？
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1楼 2009-11-16 13:20:02
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刘蓓蓓

金虫 (正式写手)
★
lcyhappy(金币+1,VIP+0):谢谢回贴 11-16 13:49
是不是柱子污染了，你可以洗洗柱子在试试看！！
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2楼2009-11-16 13:46:07
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lcyhappy

铁虫 (正式写手)
多冲洗冲洗柱子看看
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3楼2009-11-16 13:49:27
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guanghou

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
472514568(金币+2,VIP+0):谢谢你的热心解答 欢迎常来！ 11-16 22:35
dzywell(金币+1,VIP+0):谢谢回复 11-17 10:17
dzywell(金币+1,VIP+0): 11-19 09:57
您好，您的问题我来简单分析一下，首先应该确定一下您配制的流动相是否和原来一样，PH值有没有改变，如果pH值改变了的话，对样品的出峰位置的影响是很大的，色谱柱的柱温，流速 也是影响因素。如果以上我所说的全部确认重复的很好，与上次完全一致，就要考虑您的色谱柱是否发生改变，如是否有过剧烈的震动，是否用过离子对试剂，离子对试剂会改变样品的保留时间。
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4楼2009-11-16 13:54:18
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bbb555151617

木虫 (小有名气)
★ ★
472514568(金币+1,VIP+0):给个红包奖励！ 11-16 22:35
dzywell(金币+1,VIP+0): 11-19 09:57
可能是你的色谱柱里面脏了  所以柱效降低了 被分析的物质不保留了  可以用乙腈冲洗一下 如果仍然不能解决问题 那么就加入表面活性剂试试看
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5楼2009-11-16 19:34:24
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yikangyaoye

金虫 (小有名气)
★
dzywell(金币+1,VIP+0): 11-19 09:57
类似的问题多数在于流动相，不知楼主的流动相是什麽，特别是乙腈，试剂的厂家和配制流动相时的手法等都会影响到出峰时间。，而且影响较大，
再一方面就是柱子是同一个吗，柱效变化大吗？？
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6楼2009-11-17 14:28:30
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landi9568

铜虫 (小有名气)
★
xy4585618(金币+1,VIP+0): 11-21 14:29
应该是柱效降低了，好好冲冲柱子
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7楼2009-11-17 19:46:57
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bluesky1986

银虫 (初入文坛)
★
xy4585618(金币+1,VIP+0): 11-21 14:29
如果柱子没问题，是不是你的对照品有问题了？
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8楼2009-11-21 13:23:39
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jacob_827

铁虫 (初入文坛)
★
dzywell(金币+1,VIP+0): 11-23 14:48
可能是主子出问题了吧。是不是没洗干净。还有注意一下柱子的耐受性，是不是你的样品，或者洗脱机的酸碱度超过了柱子的承载范围。还有就是可能是缓冲盐毁坏柱子吧
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9楼2009-11-22 15:56:53
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chanelhu

铁虫 (初入文坛)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 12-3 03:47
我这里有一个小小的经验，我也遇到过一样的问题，我走梯度洗脱样品，乙腈和水配比的，结果样品都堆到2分钟左右了，最后才弄清楚是水相砂滤头堵了，根本没走水相了，所以是几乎乙腈在洗脱，才导致样品被快速洗脱了，不知你的问题会不会是一个。。。
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10楼2009-12-02 10:17:18
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