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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 紧急求助关于SDS-PAGE的问题，在线等
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guojing0000

木虫 (小有名气)

[交流] 紧急求助关于SDS-PAGE的问题，在线等

我最近在做SDS-PAGE，真是问题百出啊，由于没有条件学习，所以只能上网求助大家，我发我的图片上来给大家看看，我不知道为什么我的做出来的后面是一团黑，前面的条带倒是还比较清晰，很迷惑，而且试了很多次，望大家多多给我指点啊。
附上电泳详细信息：我提取的是光系统PS2颗粒，提取方法是按照BBY法，分离胶浓度是15%，浓缩胶是3%，并且为了提高分辨率分离胶中添加了6M的尿素。电泳条件是130V，电泳到溴酚蓝基本上跑出来为止，请多多指教啊。

[ Last edited by guojing0000 on 2009-11-16 at 10:36 ]
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1楼 2009-11-16 09:21:28
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xiaozi2964

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是抽提不好，造成杂蛋白和多糖没有处理好！
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2楼2009-11-16 09:24:22
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shwang007

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能电压过高，或蛋白质浓度太低，电极液的离子强度不适当
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3楼2009-11-16 09:40:10
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bcl_1984

木虫 (著名写手)
可以控制下电泳温度
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谁说我丑，只是美的不明显而已！！！
4楼2009-11-16 09:40:45
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lzhwin

木虫 (正式写手)
请楼主说一下提取蛋白和上样电泳的条件好让大家能详细分析
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5楼2009-11-16 10:04:58
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guojing0000

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lzhwin at 2009-11-16 10:04:
请楼主说一下提取蛋白和上样电泳的条件好让大家能详细分析

我提取的是PS2颗粒，提取方法是按照BBY法，分离胶浓度是15%，浓缩胶是3%，并且为了提高分辨率分离胶中添加了6M的尿素。电泳条件是130V，电泳到溴酚蓝基本上跑出来为止，请多多指教啊。
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6楼2009-11-16 10:29:37
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qqsvery

木虫 (著名写手)
从你的图上看，好像是降解了~不过每个泳道都差不多，就有点奇怪了！
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谎言和真实在河边洗澡，谎言先洗好，穿走了真实的衣服，真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言，却很难接受赤裸裸的真实。
7楼2009-11-16 13:55:02
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guojing0000

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by qqsvery at 2009-11-16 13:55:
从你的图上看，好像是降解了~不过每个泳道都差不多，就有点奇怪了！

什么降解了?能说详细一点吗？我各个泳道上的是同一个样，现在我就是在练习呢，所以没有上蛋白MARKER
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8楼2009-11-16 14:21:01
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