| 查看: 975 | 回复: 11 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
扩PCR的问题
|
|||
最近在做构建，难免要扩菌液PCR来验证阳性菌，我的习惯是在扩pcr的时候加一个阴性对照，也就是空白对照，里面只有pcr的预混，没有菌液模板，但是最近的结果很是令人苦恼，每次扩pcr的时候，阴性对照总是能扩出条带来，而且和阳性菌的目的带是一个大小，我换了好几个模板，用的是各自的引物，但是结果总是这样，阴性对照的上样道总是有目的带。但是有时候把扩的有阳性带的菌摇起来提质粒后却发现这个是假阳性。搞的我工作做了很多，都是白做。我已经排除了taq酶，buffer，水（换新的）和引物（换用质粒模板正常）的污染了。我每次都是把预混配好，然后分装到各管。最后加菌液模板。现在很头疼到底是哪里出了问题 哪位大侠能帮忙分析一下？？ |
回复此楼» 猜你喜欢
有没有人能给点建议
已经有5人回复
-
假如你的研究生提出不合理要求
已经有12人回复
-
实验室接单子
已经有7人回复
-
全日制（定向）博士
已经有5人回复
-
萌生出自己或许不适合搞科研的想法，现在跑or等等看？
已经有4人回复
-
Materials Today Chemistry审稿周期
已经有4人回复
-
参与限项
已经有3人回复
-
对氯苯硼酸纯化
已经有3人回复
-
所感
已经有4人回复
-
要不要辞职读博？
已经有7人回复
8楼2009-11-16 16:03:31
j2
木虫 (正式写手)
- 应助: 56 (初中生)
- 金币: 3797.8
- 散金: 2
- 红花: 4
- 帖子: 688
- 在线: 108.8小时
- 虫号: 452275
- 注册: 2007-11-05
- 性别: MM
- 专业: 卫生检验
2楼2009-11-16 09:12:38
fykxy_206
木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 2005.8
- 散金: 73
- 红花: 4
- 帖子: 565
- 在线: 101.7小时
- 虫号: 608969
- 注册: 2008-09-21
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2009-11-16 09:41:48
heismeng
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 898.1
- 散金: 38
- 帖子: 265
- 在线: 24.7小时
- 虫号: 316216
- 注册: 2007-03-03
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
5楼2009-11-16 10:14:53