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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 监测分析 » 【求助】考马斯亮兰溶液的配制问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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helen1985

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】考马斯亮兰溶液的配制问题 已有3人参与

请教：按照如下方法配制考马斯亮蓝溶液：考马斯亮蓝G―250 100mg溶于50ml95%乙醇中，加入100ml85%磷酸，用蒸馏水稀释至1000ml，滤纸过滤。
问题是：为什么在未定容前是红褐色，定容后就成了青色，滤纸过滤后滤液呈比较浅的棕红色，滤纸全成了蓝色。瓶子都刷了三遍，按照方法配了两遍了还是这个样子，不知这种现象正确吗？为什么会这个样子呢？做标准曲线的时候，与蛋白结合后形成的蓝色也不是像有些说的天蓝色那种，不知各位做过标准曲线的同仁，大家的标准曲线是什么啊，非常非常的感谢！
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flowerofsmile,blossomsinmyheartforever
1楼 2009-11-15 08:53:43
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arne

铁杆木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是加了磷酸后红褐色,定容后并青蓝色.
标线是蓝色的,随蛋白质浓度升高蓝色越明显
不明白你问的标线是什么 是嘛意思.
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2楼2009-11-15 09:24:41
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ralfwang

金虫 (正式写手)
看着晕晕的，呵呵
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3楼2009-11-15 09:43:09
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helen1985

银虫 (小有名气)
我问的标线就是标准曲线的公式，呵呵，没说明白
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flowerofsmile,blossomsinmyheartforever
4楼2009-11-15 20:15:37
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helen1985

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by arne at 2009-11-15 09:24:
是加了磷酸后红褐色,定容后并青蓝色.
标线是蓝色的,随蛋白质浓度升高蓝色越明显
不明白你问的标线是什么 是嘛意思.

加了磷酸后显红褐色，定容至1000mL之后也是红褐色吗？不知为什么我的显青色，呵呵
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flowerofsmile,blossomsinmyheartforever
5楼2009-11-15 20:18:41
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jiangfan0323

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我没溶的红褐色，溶解的是蓝色。我标准曲线做的还可以，就是后面测定出了问题，基本上都是比空白值低，现在在找原因
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6楼2009-11-18 16:54:44
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linglovely

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
kanavaro11(金币+1):积极 2010-07-08 14:55:38
引用回帖:
Originally posted by jiangfan0323 at 2009-11-18 16:54:44:
我没溶的红褐色，溶解的是蓝色。我标准曲线做的还可以，就是后面测定出了问题，基本上都是比空白值低，现在在找原因

会不会是稀释的倍数大了，或是蛋白质本身的浓度低了。
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7楼2010-07-08 12:33:41
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kfsh

银虫 (初入文坛)
★
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我觉得你这个现象正常吧,我的考马斯亮蓝工作液滤过之后是偏棕色的,滤纸是蓝色的.与蛋白结合后是有些暗蓝色,如果你的蛋白浓度大的话会很蓝,标准曲线你做出两个9就可以用了
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8楼2011-12-24 21:53:56
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kaylax

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
洗是要用酒精洗的，水洗不好
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发展是硬道理！
9楼2011-12-25 08:38:26
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