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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2009-11-14 17:14:
会不会是因为双链的环状质粒只被切开了单链?就像一个字母Q

质粒不酶切跑出三条带分别是超螺旋,开环,复制中间体。单酶切会出现线性,因此会不一样。如果酶切出现两条带,应该是酶切不完全导致的,加长酶切时间,点maker看看结果怎么样。另外,个人认为,限制性内切酶识别酶切位点是识别双链上的碱基对的,应该不会出现只切断一条链的情况吧。
Thank-you,so-blue.
11楼2009-11-15 10:51:07
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grief

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
超螺旋的电泳速度是最快的,切了之后会稍微慢点。如果凝胶做的没问题,应该看的出来的!
等待秋天
12楼2009-11-15 15:04:40
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liyong1981

金虫 (正式写手)


我点了没有酶切的做对照。没有酶切的大小位于我做酶切的两条带之间,怎么回事呢?
13楼2009-11-16 16:14:58
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liyong1981

金虫 (正式写手)


大虾们,讨论下啊
14楼2009-11-17 08:32:34
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liyong1981

金虫 (正式写手)


版主,你要给我个说法,扣我分是为什么?
15楼2009-11-17 08:41:27
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cato8163

银虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 11-17 11:55
11楼的就说的不错。小可最近也在做酶切,也遇到了类似问题。
总结了一下,非常支持11楼的。
16楼2009-11-17 09:14:10
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linxi8579

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0): 11-17 11:55
其实还有一种情况,我听师兄说这种切质粒的电泳不好说的,理论上环状的比线状的跑得快可是实际中也有例外的情况,这个真不好说。最好是整出一条带来,如果经常2条那就点marker或测序才知道。
17楼2009-11-17 10:08:28
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