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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 质粒酶切！
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
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引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2009-11-14 17:14:
会不会是因为双链的环状质粒只被切开了单链？就像一个字母Q

质粒不酶切跑出三条带分别是超螺旋，开环，复制中间体。单酶切会出现线性，因此会不一样。如果酶切出现两条带，应该是酶切不完全导致的，加长酶切时间，点maker看看结果怎么样。另外，个人认为，限制性内切酶识别酶切位点是识别双链上的碱基对的，应该不会出现只切断一条链的情况吧。
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Thank-you，so-blue.
11楼2009-11-15 10:51:07
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grief

铜虫 (初入文坛)
★
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超螺旋的电泳速度是最快的，切了之后会稍微慢点。如果凝胶做的没问题，应该看的出来的！
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等待秋天
12楼2009-11-15 15:04:40
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liyong1981

金虫 (正式写手)
我点了没有酶切的做对照。没有酶切的大小位于我做酶切的两条带之间，怎么回事呢？
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13楼2009-11-16 16:14:58
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liyong1981

金虫 (正式写手)
大虾们，讨论下啊
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14楼2009-11-17 08:32:34
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liyong1981

金虫 (正式写手)
版主，你要给我个说法，扣我分是为什么？
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15楼2009-11-17 08:41:27
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cato8163

银虫 (正式写手)
★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0): 11-17 11:55
11楼的就说的不错。小可最近也在做酶切，也遇到了类似问题。
总结了一下，非常支持11楼的。
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16楼2009-11-17 09:14:10
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 11-17 11:55
其实还有一种情况，我听师兄说这种切质粒的电泳不好说的，理论上环状的比线状的跑得快可是实际中也有例外的情况，这个真不好说。最好是整出一条带来，如果经常2条那就点marker或测序才知道。
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17楼2009-11-17 10:08:28
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