24小时热门版块排行榜    

查看: 709  |  回复: 6
当前主题已经存档。

刘仕博

金虫 (著名写手)

[交流] 引物设计的问题及关于引物测试~

我一般都是用引物设计的软件找引物的。最近有的基因的序列特别短,用软件根本就找不到它的引物,请问下我要怎么办呀?

才开始接触real time-PCR的实验,而且因为不是这个专业的,所以完全没有基础。
我最近在做引物测试的实验。我用的方法是每个引物做5个样,把模板分别稀释5倍,25倍,125倍和625倍。请问根据结果要怎么判断这个引物是不是可以用呀?
感激不尽~
还有,我最近的一个引物在荧光和温度的曲线图里面,在最高的峰后面又多出来了一个峰,这是怎么回事情呀?

[ Last edited by louyiceng on 2009-11-14 at 16:30 ]
回复此楼
生命在于折腾~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzhang1986

铁杆木虫 (文坛精英)

优秀版主

手工找啊
2楼2009-11-14 14:40:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仕博

金虫 (著名写手)

我做的是real time-PCR,和一般的PCR对引物的要求可能有点不一样,但具体哪里不一样我也不知道,所以不敢自己瞎找。。。
还请赐教!
生命在于折腾~
3楼2009-11-14 15:17:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

顶一下

4楼2009-11-14 16:31:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仕博

金虫 (著名写手)

感动死啦!!!!
谢谢~
生命在于折腾~
5楼2009-11-14 17:28:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1. 软件找不到它的引物,那只能手工设计引物了。
2. 在荧光和温度的曲线图里面,在最高的峰后面又多出来了一个峰,这是引物二聚体,说明引物不是很理想,视二聚体的强度判断是否需要换引物
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
6楼2009-11-15 21:37:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仕博

金虫 (著名写手)

非常感谢!!!
生命在于折腾~
7楼2009-11-15 22:45:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 刘仕博 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 大家玩filecode,现在的申请与受理打不开了 +3 dcqxinyang 2026-08-14 6/300 2026-08-14 18:03 by 690092147
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +5 Tide man 2026-08-14 6/300 2026-08-14 17:26 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +4 Ldrop2023 2026-08-13 4/200 2026-08-14 14:50 by Tide man
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +5 cratir 2026-08-14 9/450 2026-08-14 12:25 by 医学老男孩
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见