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科研党必看!体外模拟缺血缺氧,OGD/R造模全步骤整理好啦~
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一、实验前准备 - 细胞:对数生长期,汇合度80%–90% ? - 试剂:无糖DMEM、PBS、双抗 ? - 环境:三气培养箱/厌氧罐 二、标准操作流程 1.?弃原培养基,预热PBS轻洗1–2次 ? 2.?模型组换无糖DMEM,对照组换完全培养基 ? 3.?放入缺氧环境:95%N?+5%CO?,O?<0.5% ? 4.?按细胞类型孵育: ? - 神经元:2–6h ? - 心肌/肾小管:4–8h ? 5.?复氧复糖(OGD/R):换回正常完全培养基,常规培养6–24h 三、关键避坑要点 ? 全程无菌+37℃预热,减少细胞应激 ? 无糖培养基严格无葡萄糖 ? 缺氧环境密封稳定,中途不开箱 ? 先做预实验摸最佳时间 四、常用检测 CCK-8、LDH、流式凋亡、WB、免疫荧光… 照着做,模型稳定不翻车? 发自小木虫手机客户端 |
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