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hejing1728

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】过硅胶柱拿到东西太少,怎么办

本人硅胶柱层析纯化丹酚酸B,样品丹酚酸B的含量在50%左右,由于以前没有什么经验,TLC跟踪不能确定哪些是要的东西,所以就用HPLC跟踪。这样基本能看到丹酚酸B的出峰曲线。我选择含量在95%以上的浓缩,但只拿到10%的东西,后来看东西太少,把80%以上的也都浓缩了,可还是很少,加起来得率也就20%。我害怕是硅胶吸附的问题,所以把柱子缩短了一些,但是得率还不如以前呢。请问各位高手,可能是什么原因呢。你们过柱子都怎样过呀?
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hejing1728

新虫 (初入文坛)

本人是新虫,金币很少,大家体谅,以后赚多了再给奖励,呵呵呵呵呵。
2楼2009-11-13 09:45:37
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xuming896

金虫 (小有名气)

是不是反应了?
3楼2009-11-13 10:12:31
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jinzhongchong

木虫 (正式写手)

★ ★
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ynmyx(金币+1,VIP+0):谢谢您的热心解惑!! 11-13 14:19
丹酚酸B极性很大,过硅胶柱死吸附很厉害的。一般都是大孔树脂柱,然后再制备HPLC精制。
4楼2009-11-13 10:25:25
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刘蓓蓓

金虫 (正式写手)

★ ★
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ynmyx(金币+1,VIP+0):谢谢您的热心解惑!! 11-13 14:19
同意,不是样品量的问题,那就可能是柱子不合适!换一种用用咯,楼上说的大孔树酯柱可以试试!!
5楼2009-11-13 10:39:36
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xingyuanyang

木虫 (正式写手)

★ ★
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ynmyx(金币+1,VIP+0):谢谢您的热心解惑!! 11-13 14:20
丹参酚酸极性大,分子也较大,建议使用凝胶或者反相柱子,原样品纯度已经达到50%,可以用凝胶慢慢的拉拉,然后粗分物再上凝胶,应该可以拿到的。
6楼2009-11-13 10:48:04
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lpf0628

金虫 (著名写手)

酱油部-chem

同意楼上!
我们是可爱的有机民工!
7楼2009-11-13 11:13:04
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wqloxy

金虫 (正式写手)


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凝胶
不知道有没有颜色?
有颜色比较容易观察
8楼2009-11-13 12:23:02
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小药虫

金虫 (小有名气)


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你用什么流动相?看看调整一下加水量或甲酸量,也学就行了!
9楼2009-11-13 12:58:06
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zhao0919

金虫 (正式写手)


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硅胶吸附,建议改换别的色谱方法。
做不做是态度问题,做得好不好是能力问题,前者关系着做人,后者关系着做事!
10楼2009-11-13 13:34:23
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