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新虫 (小有名气)

[交流] 免疫荧光(IF)实验标准操作流程

1.?样本前处理:细胞爬片/组织切片经4%多聚甲醛固定,0.1% Triton X-100通透,5% BSA封闭非特异性结合位点。
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2.?一抗孵育:稀释后一抗4℃孵育过夜,PBS洗涤3次×5min 去除未结合抗体。
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3.?二抗孵育:荧光标记二抗室温避光孵育1-2h,避光洗涤3次×5min。
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4.?染核封片:DAPI染核10min,抗荧光淬灭封片剂封片。
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5.?镜检分析:激光共聚焦显微镜观察,采集图像并进行后续分析。
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