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铁虫 (初入文坛)

[交流] 连接的问题

用T4连接酶连接目的片段和载体,载体大小为10kb,觉得大小较大,是不是连接的时间应该延长?另外,看到有人放在4度连接,连接的时间和16度应该一样吗?
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hrbd1985

铁虫 (初入文坛)

★ ★
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amisking(金币+11,VIP+0): 11-14 22:21
amisking(金币-10,VIP+0):给我多了 11-14 22:21
看连接酶的说明书吧,我们有4度连接。16度连接
有的酶要连接过夜,也有半小时就行的!!
7楼2009-11-14 22:19:20
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一只鱼ddtt

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 11-14 22:20
本人也不是很懂,好像听本实验室的师兄们说放16度的时间比放4度的时间短,一般他们做时放16度连接10个小时。另外,载体的大小没有很大关系,只要你的目的片段不是特别大就可以了
做个有风度的人
2楼2009-11-12 10:03:30
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zxx0914

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一般在16度吧,载体大小没有关系吧,一般连接都没问题
3楼2009-11-12 10:20:09
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bioxixi

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可以适当延长连接时间,但是还是16度好,4度酶活低,连的慢
4楼2009-11-12 11:05:01
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