24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 523  |  回复: 5
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

[交流] 我要表达的一个酶分子量小了好几KD,为什么?

我最近用PET系统表达了一个蛋白酶,分子量比预计的小了好几KD,我去掉了酶蛋白自身信号肽,只表达后面的结构基因部分,而且活性也不高,请教一下是由于信号肽位置选择的问题还是蛋白酶具有细胞毒性的原因呢?如何才能修正这个问题?谢谢相告!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

就是SDS-PAGE 胶跑的,可测活性也是几乎没有啊
3楼2009-11-12 10:06:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

zhaocy8903

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
通过什么判断的?要是SDS-PAGE的话是不准的。
2楼2009-11-12 09:01:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heismeng

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
SDS-PAGE不准 酶活的话可能与你提取的方法有关
如果你的是真核的蛋白质的话 用大肠菌表达有时候也会有没有活性的情况
酶比较敏感 提取的时候尽量低温
4楼2009-11-12 10:20:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zaiguo

银虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果是用原核表达酶的话,问题很多的,是不是你的酶不稳定,还有可能是被原核中的其他酶降解,
5楼2009-11-12 11:39:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学070300 求调剂 +9 哈哈哈^_^ 2026-04-12 9/450 2026-04-12 20:13 by 380984326
[考研] 268分085602化学工程调剂 +30 月照花林。 2026-04-09 30/1500 2026-04-12 19:17 by laoshidan
[考研] 310求调剂 +13 666真好 2026-04-11 14/700 2026-04-12 16:48 by 1005715100
[考研] 297求调剂 +17 ORCHID1 2026-04-10 18/900 2026-04-12 09:59 by zhouwenxian
[考研] 0854调剂 +12 长弓傲 2026-04-09 13/650 2026-04-12 09:56 by 逆水乘风
[考研] 085410 273求调剂 +10 X1999 2026-04-09 10/500 2026-04-12 09:24 by 逆水乘风
[考研] 299求调剂 +8 ZVVZ13 2026-04-08 8/400 2026-04-12 00:40 by 蓝云思雨
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +18 MAX怅惘 2026-04-09 20/1000 2026-04-11 23:31 by zhen~
[考研] 271求调剂 +20 2261744733 2026-04-11 22/1100 2026-04-11 23:14 by labixiaoqiao
[考研] 296求调剂 +8 汪!?! 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:02 by 逆水乘风
[考研] 求调剂,一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +7 汪某. 2026-04-09 7/350 2026-04-11 14:37 by luhong1990
[考研] 生物学调剂 可调剂到生物与医药 +8 李政莹 2026-04-06 9/450 2026-04-11 10:36 by wwj2530616
[考研] 生物学调剂 +8 小冉要努力 2026-04-10 9/450 2026-04-11 10:22 by wwj2530616
[考研] 284求调剂 +19 梵@@ 2026-04-06 21/1050 2026-04-10 21:12 by zhouxiaoyu
[考研] 一志愿211,化学学硕,310分,本科重点双非,求调剂 +27 努力奋斗112 2026-04-07 30/1500 2026-04-10 15:06 by Kilig0317
[考研] 生物学求调剂 一志愿沪9,326分 +7 刘墨墨 2026-04-06 7/350 2026-04-10 08:11 by kangsm
[考研] 求调剂 +13 柒luck 2026-04-07 13/650 2026-04-08 22:46 by 猪会飞
[考研] 机械专硕273请求调剂 +6 庚申壬申 2026-04-07 6/300 2026-04-08 22:41 by bljnqdcc
信息提示
请填处理意见