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新虫 (小有名气)

[交流] 如何控制二硫键的正确配对? 已有1人参与

顺序氧化法
· 原理:利用不同侧链保护基对氧化条件的正交性,分步、依次地形成每一对二硫键。
· 关键工具:使用具有不同化学选择性脱除能力的保护基对半胱氨酸进行保护。
· 经典保护基对:
· Acm:对酸稳定,可被碘或铊盐选择性氧化脱除并形成二硫键。
· Trt/Mmt:对弱酸敏感(如1-3% TFA/DCM),可选择性脱除,脱除后暴露的巯基可在空气中或使用DMSO氧化形成二硫键。
· Boc:对强酸(如无水HF或TFMSA)稳定,但可用强酸脱除。
· 操作流程:例如,对于一个三对二硫键的肽:
1. 合成时,用 Acm, Trt, Boc 分别保护三对Cys。
2. 线性肽合成切割后,首先用弱酸选择性脱除 Trt,使第一对Cys暴露,并在温和条件下(如空气氧化)形成第一对二硫键。
3. 接着,用碘处理,选择性氧化脱除 Acm 并形成第二对二硫键。
4. 最后,在强酸(如无水HF)条件下脱除 Boc,并形成第三对二硫键。
· 优点:配对过程完全可控,可生成单一、确定构象的产物。
· 缺点:步骤繁琐,每步氧化和纯化都可能导致收率损失;需精心设计保护基组合。

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