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米彤果

[交流] 【交流】生物样品分析-求助

我最近尝试在建立一个新化合物的生物样品分析方法(该化合物为中性化合物),DAD检测器,AGILENT的Eclipse C18柱(4.6×150mm,5um),该化合物302nm处有最大吸收,流动相甲醇:水=72:28,流速1ml/min,化合物在7.008min出峰,空白血浆经正己烷、环己烷、乙醚液液提取后,流动相复溶解进样分析,发现在7.016min处有内源性杂质峰出现,也就是说血浆中杂质与我的目标化合物在这个流动相条件分不开,但现在不知道怎么优化条件,请大侠们帮忙指点,不胜感激!
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zhao0919

金虫 (正式写手)

换个流动相试试,比如乙腈:水。
做不做是态度问题,做得好不好是能力问题,前者关系着做人,后者关系着做事!
2楼2009-11-11 11:47:29
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ddw888

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1.换pH
2.换成乙腈
3.换色谱柱,除了C18,其他如苯基,氰基,C8
3楼2009-11-13 09:52:50
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米彤果

谢谢各位的热心解答。我这两天在试着调节流动相的PH值,我现在只调了pH5.0和4.0的乙酸胺/乙酸缓冲液,发现我的目标化合物及干扰峰对pH值均不敏感,所以还是了换检测波长,我的目标化合物最大吸收是在302nm,因为干扰物质在320nm以后基本无吸收,所以我现在选择324nm,损失了30%的吸收强度,基本上可以把干扰排除掉了,这样下来,最低定量限也只能到40ng/ml。
我再试试换乙腈做流动相看看情况怎么样。
各位觉得我还有必要试流动相调碱性么?
4楼2009-11-13 18:52:00
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