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新虫 (小有名气)

[交流] 如何解决聚集、二级结构导致的合成失败?

1. 改变溶剂体系(最有效的方法之一)
   · 原理:强极性溶剂可以破坏氢键,干扰肽链间的有序排列。
   · 方案:在标准的DMF溶剂中,尝试加入不同比例的二甲基亚砜(DMSO),通常使用20%-30% (v/v)。对于极端困难的序列,甚至可以尝试纯DMSO作为合成溶剂。
   · 注意:DMSO可能会引起某些侧链的副反应(如半胱氨酸氧化),并且需要检查其与所用树脂的兼容性。
2. 提高偶联效率
   · 原理:快速完成偶联,在二级结构形成之前就让肽链“长个儿”,打破其形成周期。
   · 方案:
     · 使用更强效的缩合剂:例如,将HBTU/HOBt升级为HATU/HOAt 组合。HOAt和Oxyma类添加剂能更有效地抑制消旋并提高偶联速度。
     · 增加缩合剂和氨基酸的浓度。
     · 延长偶联时间或进行双重偶联。
3. 调整脱保护步骤
   · 原理:快速移除Fmoc基团,减少肽链在碱性环境下形成β-折叠的时间窗口。
   · 方案:使用20% 哌嗪(Piperazine) 代替常用的20% 4-甲基哌啶(Piperidine)。哌嗪脱保护速度更快,但需注意其溶解度可能稍差。
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