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playboy723金虫 (正式写手)
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[交流]
单酶切遇到问题了 请指教
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向各位虫友请教一个问题 我目前正在构建载体 设计的是用EcoR1单酶切连接进表达载体中 可是现在我目的基因已经扩出来了 酶切也挺成功 可是就是连不进去 我发现原因主要在表达载体上 我用EcoR1切开载体后按照常规用CIAP进行载体去P 可是发现载体自连的非常严重 感觉CIAP根本没有效果似的 满满的板子上都是自连的克隆（我连续做了几次都是如此） 所以我想请教下大家 看有没有单酶切做的好的虫友 遇到我的这些问题该怎么办 望不吝赐教 这个载体已经构建很长时间了 我都快失去耐心了 大家帮帮忙 谢谢 [ Last edited by 350784478 on 2009-11-14 at 11:57 ] |
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