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36678293铜虫 (正式写手)
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[交流]
基因克隆到pCAMIBA1300
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请教各位: 我的一个基因(1.5kbp)想克隆到pCAMBIA(12kbp,kan)上,但是做了好多次链接,就是连不上去,PCR双酶切链接试过了,基因从T载体上切下在链接也试过了,但是就是不长斑,感受态的效率也没问题,XL-GOLD的,10的8次方的效率应该有;链接酶试过SOLITION 1,和T4, 链接体系10ul和20ul都试过了,载体与片段的比例1:1--1:10都做过了。 可是就不是不知道什么原因,在这里请教大家了。。。。 不懂的不要留言,谢谢!!! [ Last edited by 36678293 on 2009-11-9 at 19:34 ] |
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