24小时热门版块排行榜    

查看: 900  |  回复: 18
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

36678293

铜虫 (正式写手)

[交流] 基因克隆到pCAMIBA1300

请教各位:


我的一个基因(1.5kbp)想克隆到pCAMBIA(12kbp,kan)上,但是做了好多次链接,就是连不上去,PCR双酶切链接试过了,基因从T载体上切下在链接也试过了,但是就是不长斑,感受态的效率也没问题,XL-GOLD的,10的8次方的效率应该有;链接酶试过SOLITION 1,和T4, 链接体系10ul和20ul都试过了,载体与片段的比例1:1--1:10都做过了。

可是就不是不知道什么原因,在这里请教大家了。。。。


不懂的不要留言,谢谢!!!

[ Last edited by 36678293 on 2009-11-9 at 19:34 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangnanxuetong

金虫 (小有名气)

首先 看看载体酶切是否有问题!
然后在连接过程中,尝试几种不同比例连接 试试!
12楼2009-11-11 10:19:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 36678293 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见