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求助大佬:AKTA Avant方法开发时峰形拖尾该怎么优化?
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| 想请教一下各位在用AKTA Avant做单抗纯化时有没有遇到过酸性峰拖尾特别严重的情况——我们最近摸方法时发现即使上了精氨酸缓冲液并且梯度设得贼平缓,目的蛋白的峰还是像蜗牛爬一样拖个没完,明明系统流速和pH都校准过了,预装柱也是新的HiScreen™系列,但就是压不住这个尾巴,看文献说可能和样品负载量或者填料特性有关,但AKTA Avant自带的Unicorn方法里似乎没有专门针对疏水作用导致的拖尾的优化模块(或者是我没找到?),所以想蹲个实战经验:除了调整缓冲液离子强度或者换填料这种大招之外,有没有什么藏在软件高级设置里的骚操作或者梯度微调技巧能救救这种尴尬的峰型?先给递茶了🍵 |
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