24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 724  |  回复: 13
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 陌默 的 2 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

陌默

[交流] 求租引物上酶切位点的问题!

扩增细菌的16S rDNA的通用引物,能否在上下游分别添加ECoRI和HindⅢ酶切位点啊?

上游:AGAGTTTGATCCTGG

下游:ACGGCTACCTTGTTA



就是为了细菌分类和鉴定,想做TA克隆,所以需要加酶切位点,不知上面两个酶切位点可否?

急求高手指点!
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

引用回帖:
Originally posted by 陌默 at 2009-11-10 12:24:

我还有一个问题,我扩增的条带,16S,1500bp左右,连接到T载体上,酶切怎么看最后的电泳的长度是否正确呢?我不太会看载体上的相关东西哦····

点maker啊,如果切动的话,是重组质粒就会出两条带,分别为3kb(T 载)左右和1.5kb(目的片段)左右。
Thank-you,so-blue.
12楼2009-11-10 12:30:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

既然做TA克隆为何还要在引物上面加酶切位点?
2楼2009-11-09 13:08:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjlbest

木虫 (著名写手)

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 11-10 12:38
我也想问的是1楼的问题,连接T载体是不需要酶切位点的,普通的Taq酶扩增后自动在DNA的3‘端加上一个A。可直接与Tvector连接的,如用高保真酶如Primerstar,扩增后的DNA产物无A,只要加上A尾就可以了,一般情况下,要进行定位克隆时才用到酶切位点的e
3楼2009-11-09 13:44:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

我想楼主大概希望TA克隆后筛重组子用双酶切鉴定下。这样没必要,可以直接做PCR鉴定,即使酶切鉴定的话,T载上也有现成的酶切位点。
Thank-you,so-blue.
4楼2009-11-09 14:18:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 08工科,295,接受跨专业调剂 +3 lmnlzy 2026-03-30 3/150 2026-03-30 17:49 by wangjy2002
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +16 Mr. Z 2026-03-25 17/850 2026-03-30 17:04 by 晴空210210
[考研] 342求调剂 +4 加油a李zs 2026-03-26 4/200 2026-03-30 16:39 by 晶体之美
[考研] 085602化工求调剂(331分) +6 111@127 2026-03-30 6/300 2026-03-30 16:26 by 星空星月
[考研] 329求调剂,一志愿西北工业大学,材料工程(085601) +5 小小机灵虫 2026-03-29 11/550 2026-03-30 15:02 by Wang200018
[考研] 求调剂 +7 研研,接电话 2026-03-24 8/400 2026-03-30 14:14 by 白云朵朵飞
[考研] 0703化学 +14 妮妮ninicgb 2026-03-27 14/700 2026-03-30 12:46 by fangnagu
[基金申请] 面上5B能上会吗? +7 redcom 2026-03-29 7/350 2026-03-30 12:44 by 爱搞研究的小孩
[考研] 337求调剂 +6 《树》 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:15 by herarysara
[考研] 317求调剂 +10 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 10/500 2026-03-30 09:45 by longlotian
[考研] 070305高分子化学与物理 304分求调剂 +12 c297914 2026-03-28 12/600 2026-03-29 16:21 by Serene1974
[考研] 330分求调剂 +5 qzenlc 2026-03-29 5/250 2026-03-29 07:37 by 无际的草原
[考研] 283求调剂 +7 A child 2026-03-28 7/350 2026-03-28 12:05 by zllcz
[考研] 291求调剂 +15 hhhhxn.. 2026-03-23 21/1050 2026-03-28 11:26 by self2008
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +15 荷包蛋hyj 2026-03-26 15/750 2026-03-28 04:13 by fmesaito
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:02 by zhyzzh
[考研] 085600,材料与化工321分,求调剂 +9 大馋小子 2026-03-27 9/450 2026-03-27 14:30 by mmm just
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
信息提示
请填处理意见