24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 722  |  回复: 13
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 陌默 的 2 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

陌默

[交流] 求租引物上酶切位点的问题!

扩增细菌的16S rDNA的通用引物,能否在上下游分别添加ECoRI和HindⅢ酶切位点啊?

上游:AGAGTTTGATCCTGG

下游:ACGGCTACCTTGTTA



就是为了细菌分类和鉴定,想做TA克隆,所以需要加酶切位点,不知上面两个酶切位点可否?

急求高手指点!
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


陌默(金币+1,VIP+0): 11-10 12:21
引用回帖:
Originally posted by 陌默 at 2009-11-9 21:06:

对,我就是要筛重组子,所以想用PCR和酶切鉴定,觉得这样保险点啊。我就想知道,我能不能用EcoRI 和HindⅢ来做酶切呢??

可以的,T载上有这两个酶切位点。
Thank-you,so-blue.
10楼2009-11-10 09:38:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

既然做TA克隆为何还要在引物上面加酶切位点?
2楼2009-11-09 13:08:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjlbest

木虫 (著名写手)

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 11-10 12:38
我也想问的是1楼的问题,连接T载体是不需要酶切位点的,普通的Taq酶扩增后自动在DNA的3‘端加上一个A。可直接与Tvector连接的,如用高保真酶如Primerstar,扩增后的DNA产物无A,只要加上A尾就可以了,一般情况下,要进行定位克隆时才用到酶切位点的e
3楼2009-11-09 13:44:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

我想楼主大概希望TA克隆后筛重组子用双酶切鉴定下。这样没必要,可以直接做PCR鉴定,即使酶切鉴定的话,T载上也有现成的酶切位点。
Thank-you,so-blue.
4楼2009-11-09 14:18:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 求调剂 330分 085600材料与化工 +3 gqhhh 2026-03-22 3/150 2026-03-29 00:52 by 544594351
[考研] 085600,专业课化工原理,321分求调剂 +4 大馋小子 2026-03-28 4/200 2026-03-29 00:32 by 544594351
[考研] 0856材料化工调剂 总分330 +11 zhubinhao 2026-03-27 11/550 2026-03-28 20:22 by 418490947
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +7 1428151015 2026-03-27 7/350 2026-03-28 19:58 by S240
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +3 萝卜炖青菜 2026-03-28 3/150 2026-03-28 14:11 by 唐沐儿
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-24 4/200 2026-03-28 13:17 by 唐沐儿
[考研] 266分,求材料冶金能源化工等调剂 +7 哇呼哼呼哼 2026-03-27 9/450 2026-03-28 12:22 by zllcz
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 材料292调剂 +12 橘颂思美人 2026-03-23 12/600 2026-03-27 15:44 by caszguilin
[考研] 安徽大学专硕生物与医药专业(086000)324分,英语已过四六级,六级521,求调剂 +4 美味可乐鸡翅 2026-03-26 4/200 2026-03-27 15:27 by 星空星月
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[基金申请] 请教下大家 2026年国家基金申请是双盲审吗? +3 lishucheng1 2026-03-22 5/250 2026-03-24 08:22 by gltch
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
信息提示
请填处理意见