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汕头大学海洋科学接受调剂
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chengtao9688

木虫 (小有名气)

[交流] 关于质粒酶切的问题

请问哪们大侠遇到这样的问题:
    我对质粒的两个酶切位点进行单酶切,但是跑出来的条带不一样大。请问正常吗?

[ Last edited by 350784478 on 2009-11-9 at 22:24 ]
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jjlbest

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
chengtao9688(金币+2,VIP+0): 11-9 09:28
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-11 15:18
请问楼主是怎么个不一样法?大小不一样?差多少?还有就是是用两种不同的酶单酶切还是用两组不用的酶双酶切?如果是单酶切的话,结果应该是不会有什么区别的。
2楼2009-11-09 09:26:26
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chengtao9688

木虫 (小有名气)

当然是用两种不同的酶单切
片段大小不一样,相差也就几百bp吧,我也估计不准,是比较明显的不在一条线上的。
3楼2009-11-09 09:34:39
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-9 09:35
1949stone(金币+1,VIP+0):欢迎交流 11-9 09:49
酶切后大小是多大,与质粒大小一样吗?是否一个切开,另一个没切开?
Thank-you,so-blue.
4楼2009-11-09 09:34:58
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chengtao9688

木虫 (小有名气)

我也怀疑有一个没有被切开
5楼2009-11-09 09:37:46
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bioxixi

木虫 (著名写手)

★ ★
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-9 09:44
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-11 15:18
这两个酶切位点在质粒上都是单一存在的吗?
首先你要搞清楚这一点
如果是单一的,大小不一样就怪了
6楼2009-11-09 09:39:51
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chengtao9688

木虫 (小有名气)

呵呵 当然是单一的了
7楼2009-11-09 09:44:27
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qqsvery

木虫 (著名写手)

★ ★
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-9 10:28
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-11 15:18
是两个片段不一样大,还是加起来与质粒不一样大?如果是后者,很可能是一个酶没加够,酶切不完全导致的结果。
谎言和真实在河边洗澡,谎言先洗好,穿走了真实的衣服,真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言,却很难接受赤裸裸的真实。
8楼2009-11-09 09:53:48
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zyzlyl

银虫 (小有名气)


chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-11 15:18
这要看你用的是什么酶,单酶切如果切的位点不一样,切下来的片段也不一样的啊。
具体的看你所构建的载体上的片段大小。
外面没有别人……
9楼2009-11-09 10:38:16
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断弦的琴

铁虫 (小有名气)


chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-11 15:18
友情提示:注意酶的 “星” 活性。
不知道失去了多少以后我们能不再痛苦,不知道偿多少冷暖以后我们能看破生命.
10楼2009-11-10 10:47:27
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