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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于质粒酶切的问题
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chengtao9688

木虫 (小有名气)

[交流] 关于质粒酶切的问题

请问哪们大侠遇到这样的问题：
    我对质粒的两个酶切位点进行单酶切，但是跑出来的条带不一样大。请问正常吗？

[ Last edited by 350784478 on 2009-11-9 at 22:24 ]
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1楼 2009-11-09 08:59:25
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jjlbest

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
chengtao9688(金币+2,VIP+0): 11-9 09:28
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-11 15:18
请问楼主是怎么个不一样法？大小不一样？差多少？还有就是是用两种不同的酶单酶切还是用两组不用的酶双酶切？如果是单酶切的话，结果应该是不会有什么区别的。
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2楼2009-11-09 09:26:26
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chengtao9688

木虫 (小有名气)
当然是用两种不同的酶单切
片段大小不一样，相差也就几百bp吧，我也估计不准，是比较明显的不在一条线上的。
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3楼2009-11-09 09:34:39
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-9 09:35
1949stone(金币+1,VIP+0):欢迎交流 11-9 09:49
酶切后大小是多大，与质粒大小一样吗？是否一个切开，另一个没切开？
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Thank-you，so-blue.
4楼2009-11-09 09:34:58
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chengtao9688

木虫 (小有名气)
我也怀疑有一个没有被切开
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5楼2009-11-09 09:37:46
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bioxixi

木虫 (著名写手)
★ ★
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-9 09:44
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-11 15:18
这两个酶切位点在质粒上都是单一存在的吗？
首先你要搞清楚这一点
如果是单一的，大小不一样就怪了
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6楼2009-11-09 09:39:51
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chengtao9688

木虫 (小有名气)
呵呵 当然是单一的了
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7楼2009-11-09 09:44:27
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qqsvery

木虫 (著名写手)
★ ★
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-9 10:28
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-11 15:18
是两个片段不一样大，还是加起来与质粒不一样大？如果是后者，很可能是一个酶没加够，酶切不完全导致的结果。
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谎言和真实在河边洗澡，谎言先洗好，穿走了真实的衣服，真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言，却很难接受赤裸裸的真实。
8楼2009-11-09 09:53:48
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zyzlyl

银虫 (小有名气)
★
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-11 15:18
这要看你用的是什么酶，单酶切如果切的位点不一样，切下来的片段也不一样的啊。
具体的看你所构建的载体上的片段大小。
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外面没有别人……
9楼2009-11-09 10:38:16
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断弦的琴

铁虫 (小有名气)
★
chengtao9688(金币+1,VIP+0): 11-11 15:18
友情提示：注意酶的 “星” 活性。
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不知道失去了多少以后我们能不再痛苦,不知道偿多少冷暖以后我们能看破生命.
10楼2009-11-10 10:47:27
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