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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助：质粒提取
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yoyoyehan

[交流] 求助：质粒提取

最近提取质粒，一直提不出来，先用宝生物的盒，后来换用天根的，操作中的现象和试剂盒上描述的一样，可是电泳检测就是没有带，marker跑的很好，很是郁闷，请各位虫友帮忙，
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1楼 2009-11-08 20:25:23
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695

木虫 (职业作家)
★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0):谢谢交流 11-8 21:16
泳道很干净吗？要是不干净那可是就提取出蛋白，基因组什么东西了，试剂没问题吧？还有加三个溶液的时候最好严格按照说明书上的操作进行
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2楼2009-11-08 20:48:38
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0):有可能 11-8 21:17
或许根本就没有质粒
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小木虫之有关部门负责人
3楼2009-11-08 21:06:55
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quiller2000

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
1949stone(金币+5,VIP+0):鼓励新朋友 11-8 21:16
先看看你的质粒的拷贝数是不是很低
然后用做个小提试试，看看有没有东西；有时候试剂盒的离心柱的吸附效率很低（条件不合适，老化？）
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致良知
4楼2009-11-08 21:09:27
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竹子2225

银虫 (小有名气)
★
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菌体量要是太多的 话，也会提不出来，影响裂解液的裂解效率
再有就是看拷贝数了
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5楼2009-11-08 21:34:51
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wish0310

至尊木虫 (著名写手)
★
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是不是最后70%的酒精洗涤时，洗掉了？
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6楼2009-11-08 22:37:25
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crab1983

铜虫 (小有名气)
★
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我们没用过试剂盒，也提出质粒来了，质粒相对来说算是好提的，你会不会是摇菌的时候出现问题了，再有碱裂解的时间不能太长 一般5分钟就行
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7楼2009-11-12 16:19:46
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫
★
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推荐使用BIOMEGA试剂盒
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仕不可不弘毅，任重而道远
8楼2009-11-12 16:27:03
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yc422172

新虫 (小有名气)
★
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正在学习中，我也正在提出质粒。。
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很高兴能和大家一起交流！
9楼2009-11-12 16:59:24
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)
★
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提质粒按照试剂盒的步骤来也不一定准确，还是看实验室的人，仔细的看一遍 为好。我第一次安说明书来的，也没有提出来，还是老师给指导了下
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10楼2009-11-12 17:06:34
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