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[交流] 大鼠糖尿病模型实验流程及注意事项

一、常用糖尿病模型类型及选择
模型类型        适用研究        周期        优缺点
STZ单次大剂量诱导(Ⅰ型)        胰岛素缺乏、酮症酸中毒研究        3-7天成模        成模快,但易致死(需控制剂量)。
高脂饮食+小剂量STZ(Ⅱ型)        胰岛素抵抗+β细胞功能衰退        8-12周        更接近人类T2DM,稳定性高。
自发性模型(ZDF/GK大鼠)        遗传性糖尿病机制研究        长期(>12周)        成本高,周期长,但病理更自然。
二、STZ诱导Ⅰ型糖尿病模型流程
1. 实验前准备动物:SD或Wistar大鼠(雄性,180-220 g),空腹12小时(禁食不禁水)。
试剂:链脲佐菌素(STZ,Sigma,需避光现配,用0.1 M柠檬酸钠缓冲液pH 4.5溶解,冰浴)。
血糖试纸、胰岛素ELISA试剂盒。
2. 造模步骤
1.        STZ注射:
剂量:50-65 mg/kg(单次腹腔注射,具体剂量预实验确定)。
对照:注射等体积柠檬酸钠缓冲液。
2.        血糖监测:
注射后48小时测尾尖随机血糖≥16.7 mmol/L(300 mg/dL)为成模标准。
每周监测1-2次,维持高血糖状态。
3. 术后管理
饮水补充:10%蔗糖水48小时(预防STZ急性低血糖)
抗感染:必要时添加抗生素(如诺氟沙星)至饮水
三、高脂饮食+小剂量STZ诱导Ⅱ型糖尿病流程
1. 高脂饮食预喂养
饲料配方:45-60%脂肪(如D12451,Research Diets)
周期:4-8周,诱导胰岛素抵抗(每周测体重、空腹血糖)。
2. STZ注射
剂量:25-35 mg/kg多次低剂量,如连续3-5天。
成模标准:空腹血糖≥11.1 mmol/L(200 mg/dL),伴胰岛素抵抗(HOMA-IR升高)。
3. 检测指标
口服糖耐量(OGTT):禁食6小时后灌胃葡萄糖2 g/kg,测0/30/60/120 min血糖。
胰岛素耐量ITT:腹腔注射胰岛素0.5-1 U/kg,测血糖下降速率
四、关键注意事项
1. STZ操作要点
避光避热:STZ溶液需现配现用(15分钟内注射完毕),冰浴保存
剂量校准:不同批次STZ活性差异大,需预实验(建议从低剂量开始)
2. 动物福利
血糖控制:若血糖持续>30 mmol/L,需胰岛素干预(如甘精胰岛素1-2 U/kg)或人道终点。
并发症监测:多饮多尿(记录饮水量)、体重下降、白内障(定期眼科检查)
3. 模型验证
胰腺病理:HE染色观察β细胞坏死Ⅰ型或胰岛淀粉样沉积Ⅱ型。
血清指标:胰岛素(ELISA)、糖化血红蛋白HbA1c
五、实验流程表示例(高脂饮食+STZ)
Week 1-8 高脂饮食喂养,每周测空腹血糖、体重
Week 8 小剂量STZ(30 mg/kg×3天,腹腔注射)
Week 9-12     继续高脂饮食,监测OGTT、ITT
Week 12       取材(血清、胰腺、肝脏),病理分析
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