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yyoouuyy

新虫 (初入文坛)

[交流] 好氧甲烷氧化菌分离筛选 已有2人参与

最近在做甲烷氧化菌筛选分离,采用NMS培养基富集,在富集液中扩增出了甲烷代谢的基因pmoA,但把富集菌液稀释涂布到平板(除了加琼脂,其他组分与液体培养基一样)上,放在真空干燥器里,充入甲烷倒置培养,第二天就长出来很多菌,挑单菌落做不充甲烷,放空气里的对照,发现它们也长出来了,但NMS培养基里没有碳源,不知道它们是怎么长出来的,感觉这个NMS培养基的选择性好差啊,我看文献里,好像都是7-14天才长出单菌落,是我等待时间太短吗?我之前不知道这个培养基的选择性这么差,调的都是3-4天长出来的单菌落。所以跪求同做甲烷氧化菌筛选的友友们一起探讨!
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梦想终将实现!

新虫 (正式写手)


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引用回帖:
9楼: Originally posted by yyoouuyy at 2025-06-04 19:01:53
您觉得这样做正确吗
...

应该是可以的,记得氧气大约百分之十几就行,具体的我也不太清楚。杂菌污染问题解决了吗?如果是那种干燥的蔓延菌落的话可能是芽孢杆菌属污染了,培养基有有机污染物的话就可能生长,可以换更纯净的琼脂来培养,试试看行不行吧
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10楼2025-06-06 00:12:04
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HENRICIS

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
NMS培养基啥成分呢
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2楼2025-05-21 15:35:11
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梦想终将实现!

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以往硝化菌和固氮菌那一方面想,是否不光有甲烷代谢途径,可以抽真空再填充纯氮或纯氧来排除这种可能
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3楼2025-05-21 23:00:14
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yyoouuyy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 梦想终将实现! at 2025-05-21 23:00:14
可以往硝化菌和固氮菌那一方面想,是否不光有甲烷代谢途径,可以抽真空再填充纯氮或纯氧来排除这种可能

谢谢您的回复,但是我用氮气氧气曝气后,不长菌了是为什么呢
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4楼2025-05-31 00:47:33
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