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好氧甲烷氧化菌分离筛选 已有2人参与
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最近在做甲烷氧化菌筛选分离，采用NMS培养基富集，在富集液中扩增出了甲烷代谢的基因pmoA，但把富集菌液稀释涂布到平板（除了加琼脂，其他组分与液体培养基一样）上，放在真空干燥器里，充入甲烷倒置培养，第二天就长出来很多菌，挑单菌落做不充甲烷，放空气里的对照，发现它们也长出来了，但NMS培养基里没有碳源，不知道它们是怎么长出来的，感觉这个NMS培养基的选择性好差啊，我看文献里，好像都是7-14天才长出单菌落，是我等待时间太短吗？我之前不知道这个培养基的选择性这么差，调的都是3-4天长出来的单菌落。所以跪求同做甲烷氧化菌筛选的友友们一起探讨！ 发自小木虫手机客户端 |
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其实我也不太懂，但是我可以提一些建议，首先资料上说目的菌种培养时间约俩星期，结果一两天就长了，毋庸置疑说明是杂菌污染，可能是好氧异养杂菌，培养基中含有微量有机污染物(可能来自琼脂)，甲烷充气，如果不是纯甲烷的话(甲烷空气混合)就会利用氧气与微量污染物生长，氮气填充不生长估计是氮气很纯，氧气含量几乎为零，氧气填充不生长可能是某些有机物在强氧化环境中被分解，或者是再次培养时有机污染物含量相较于之前的含量少了所以不长，可以试一下更换更纯净的琼脂凝固剂，排除有机污染物的影响… 发自小木虫手机客户端 |
7楼2025-06-02 11:25:44
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应该是可以的，记得氧气大约百分之十几就行，具体的我也不太清楚。杂菌污染问题解决了吗？如果是那种干燥的蔓延菌落的话可能是芽孢杆菌属污染了，培养基有有机污染物的话就可能生长，可以换更纯净的琼脂来培养，试试看行不行吧 发自小木虫手机客户端 |
10楼2025-06-06 00:12:04
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