应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 连接产物转化涂板问题
111/2返回列表12下一页
查看: 1730  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

dudu1161

银虫 (小有名气)

[交流] 连接产物转化涂板问题

大家好！我的连接产物转化后，涂在有氨苄抗性的固体培养基上，37℃培养18h后，一个板上只长了6个小菌落，请虫友们指点一下，我需要继续培养一下吗？因为我打算挑菌摇过夜后提质粒，感觉菌落太小了，怕摇不出来，谢谢大家！
回复此楼

» 猜你喜欢
Stop walking today and you will have to run tomorrow!
1楼 2009-11-06 15:33:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2,VIP+0):您真是热心人 而且懂的知识也很多 向您致敬！ 11-6 16:17
可以继续培养嘛，建议你给这六个菌落做个记号 以后再张出来的可能会是假阳性。
赞一下(7人) 回复此楼
可以用QQ找我……
2楼2009-11-06 15:42:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不要害怕出长不出来，没有关系的啊，直接挑菌摇上
赞一下(1人) 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2009-11-06 15:57:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢交流 11-6 16:18
引用回帖:
Originally posted by gyesang at 2009-11-6 15:57:
不要害怕出长不出来，没有关系的啊，直接挑菌摇上

用这六个小菌做个菌落PCR鉴定一下，然后再放到培养箱中培养，再将验证正确的接LB抽质粒。直接接LB然后抽质粒酶切验证也是可以的。
赞一下(7人) 回复此楼
4楼2009-11-06 16:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zier1011

木虫 (著名写手)
★
amisking(金币+1,VIP+0): 11-6 16:54
你培养多长时间了？如果你做的是大肠杆菌转化，不妨在培养几个小时，到晚上菌落大些了，你在挑菌做液体培养，明天正好提质粒
赞一下(20人) 回复此楼
花还香香的
5楼2009-11-06 16:51:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by dudu1161 at 2009-11-6 15:33:
大家好！我的连接产物转化后，涂在有氨苄抗性的固体培养基上，37℃培养18h后，一个板上只长了6个小菌落，请虫友们指点一下，我需要继续培养一下吗？因为我打算挑菌摇过夜后提质粒，感觉菌落太小了，怕摇不出来，谢 ...

养了18个小时还是很小的话，感觉不太正常啊，据经验多数是假的，除非你用的是XL1-Blue这个菌株，这个菌株长得稍慢，如果是大肠杆菌其他菌株的话，多数是假阳性，你可以做个菌落PCR试试看，将菌落稀释在10ul水里面，然后取4微升做实验PCR，剩下的放冰山保存到晚上，等PCR结果出来，取阳性的放LB里面养上，关于剩下的稀释在水里的菌保存问题，有人放-20度保存，有人4度 保存，我直接就放在桌子上，过10个小时再培养，没事，菌没那么容易就死
赞一下(1人) 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
6楼2009-11-06 17:03:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dudu1161

银虫 (小有名气)
多谢大家的热心解答，今晚看到大家的回帖感觉心里很温暖，多谢虫友们，因为最近正好有事，所以现在才迟迟给大家回，谢谢大家！
赞一下 回复此楼
Stop walking today and you will have to run tomorrow!
7楼2009-11-08 01:08:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dudu1161

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gyesang at 2009-11-6 17:03:

养了18个小时还是很小的话，感觉不太正常啊，据经验多数是假的，除非你用的是XL1-Blue这个菌株，这个菌株长得稍慢，如果是大肠杆菌其他菌株的话，多数是假阳性，你可以做个菌落PCR试试看，将菌落稀释在10ul水里 ...

谢谢您的指点，我是直接用连接产物涂板了，没有放在LB培养基里摇一小时再涂，都怪自己没好好查阅文献，懂得太少了，谢谢您！
赞一下 回复此楼
Stop walking today and you will have to run tomorrow!
8楼2009-11-08 01:12:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dudu1161

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zier1011 at 2009-11-6 16:51:
你培养多长时间了？如果你做的是大肠杆菌转化，不妨在培养几个小时，到晚上菌落大些了，你在挑菌做液体培养，明天正好提质粒

您好！培养了18个小时，我做的大肠杆菌转化，谢谢您的解答！
赞一下 回复此楼
Stop walking today and you will have to run tomorrow!
9楼2009-11-08 01:15:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dudu1161

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 红多多 at 2009-11-6 15:42:
可以继续培养嘛，建议你给这六个菌落做个记号 以后再张出来的可能会是假阳性。

好的，谢谢您，因为我是新手，所以很多都是请教的师姐，一般师姐培养的话都不会超过16个小时的，呵呵，多谢啦
赞一下 回复此楼
Stop walking today and you will have to run tomorrow!
10楼2009-11-08 01:16:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dudu1161 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +8 医学老男孩 2026-08-13 25/1250 2026-08-13 21:15 by yq199112088
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +4 majunge000 2026-08-11 6/300 2026-08-13 16:50 by 四季常青藤
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭