| 查看: 644 | 回复: 0 | |||
夏末～易科新虫 (小有名气)
|
[交流]
HE染色模糊不清怎么办？
|
|
一、脱蜡不彻底 1. 原因：烤片温度/时间不足、二甲苯脱蜡时间过短或试剂失效。 2. 解决方法：提高烤片温度（60-65℃）或延长烤片时间至1-2小时。 更换新鲜二甲苯，延长脱蜡时间（建议每次脱蜡10-15分钟）。 检查乙醇脱水梯度，避免残留二甲苯影响后续染色。 二、脱水不完全或透明不良 1. 原因：低浓度乙醇停留时间过长、高浓度乙醇时间不足，导致水分残留或透明不彻底。 2. 解决方法：优化脱水流程：低浓度乙醇（如70%、80%）停留时间缩短（1-2分钟），高浓度乙醇（95%、100%）延长至3-5分钟。 重新脱水透明：若已封片，可移除盖玻片，用二甲苯溶解封固剂后，重新进行脱水、透明处理。 三、组织固定不良 1. 原因：固定不及时、固定液浓度不足或体积过少，导致组织自溶或渗透不均（如淋巴结中央发灰）。 2. 解决方法：确保固定液为4%中性甲醛，体积为标本的4-5倍，大组织需剖开固定。对致密组织（如淋巴结）可先用无水乙醇-乙醚混合液预处理5-10分钟，再补充媒染。 四、切片质量缺陷 1. 原因：切片厚薄不均、刀痕、气泡或卷曲。 2. 解决方法：检查切片刀角度（建议5°）和锋利度，避免切片过厚（推荐3-5μm） 制片时避免手抖或设备松动，确保切片平整无气泡。 五、染色与分化异常 1. 原因：苏木素过度氧化或分化时间不足，导致核质对比差。 伊红染色后脱水不彻底，残留水分导致雾化。 2. 解决方法： 更换新鲜苏木素，染色后充分蓝化（流水冲洗或弱碱性溶液处理）。 伊红染色后严格脱水，避免低浓度乙醇停留过久导致褪色。 六、其他注意事项 试剂质量：定期更换梯度乙醇和二甲苯，避免试剂污染或失效。 环境控制：室温低于20℃时，需延长苏木素染色时间或预热染液。  发自小木虫手机客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有236人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
