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汕头大学海洋科学接受调剂
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森淼658

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】总黄酮含量测定问题

最近想进行一个中药的总黄酮含量测定,应用经典的亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠法,对照品用芦丁,在样品测定时空白溶液用空白试剂还是用药材原液。芦丁用多大浓度的乙醇溶解,样品的溶解试剂也和芦丁的溶解试剂一致吗。不一致影响大吗?谢谢各位高手!
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总黄酮

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三脉紫菀

木虫 (小有名气)


森淼658(金币+1):谢谢参与
槲皮素显色在510nm处没有最大吸收。用碱性对照。样品也是。芦丁用70醇溶。
6楼2009-11-06 13:05:44
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查看全部 6 个回答

ddw888

金虫 (小有名气)

★ ★
森淼658(金币+1):谢谢参与
ynmyx(金币+1,VIP+0):谢谢您的热心解惑!! 11-6 08:48
空白用溶剂,不用样品。以下供参考。样品溶剂应与对照品一致,影响视波长长短而定。波长越长影响越小。
总黄酮  对照品溶液的制备  精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品200mg,置100ml量瓶中,加甲醇70ml,置水浴上微热使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。精密吸取10ml,置100ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得(每1ml中含无水芦丁0.2mg)。
标准曲线的制备  精密量取对照品溶液0ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml与6.0ml,分别置25ml量瓶中,各加水至6ml,加5%亚硝酸钠溶液1ml,使混匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液1ml,摇匀,放置6分钟,加氢氧化钠试液10ml,再加水至刻度,摇匀,放置15分钟,照分光光度法(中国药典2000年版二部附录IV B),在500nm的波长处测定吸收度,以吸收度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
测定法  取本品粗粉约1g,于60℃干燥6小时,精密称定,置索氏提取器中,加乙醚120ml,加热回流至提取液无色,放冷,弃去乙醚液。再加甲醇90ml,加热回流至提取液无色,移置100ml量瓶中,用甲醇少量洗涤容器,洗液并入量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。精密量取10ml,置100ml量瓶中,加水至刻度,摇匀。精密量取3ml,置25ml量瓶中,照标准曲线制备项下的方法,自“加水至6ml”起依法测定吸收度,从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量(μg),计算,即得。
2楼2009-11-06 08:46:30
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bbb555151617

木虫 (小有名气)

★ ★
森淼658(金币+1):谢谢参与
ynmyx(金币+1,VIP+0):谢谢您的热心解惑! 11-6 11:55
首先要过聚酰胺柱  先用水洗脱 再用70%洗脱  不可以直接用药材原液测定总黄酮 因为没有相应的空白溶液
空白用70%乙醇就可以了
3楼2009-11-06 11:39:36
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白开水

木虫 (著名写手)


森淼658(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by bbb555151617 at 2009-11-6 11:39:
首先要过聚酰胺柱   

不需要。
苷元用槲皮素
苷用芦丁

[ Last edited by 白开水 on 2009-11-6 at 12:22 ]
4楼2009-11-06 12:20:53
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