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llzhang2012

应助: (幼儿园)
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[交流] 克隆基因全长引物设计问题已有9人参与

已知一序列全长，如何根据此序列设计引物克隆出全长，我是新手，麻烦各位详细介绍一下设计全长引物的步骤，最近实验急需，非常感谢！！！
我以前克隆过片段，没有做过全长，引物设计的一些基本原则都已了解，但是设计全长引物一点都不懂，劳烦各位，谢谢！

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1楼 2009-11-04 14:59:57

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xjzw

新虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 260.8
帖子: 57
在线: 18.6小时
虫号: 2030859
注册: 2012-09-26
专业: 植物遗传学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

17629843楼: Originally posted by sd3824289 at 2012-07-25 16:36:12
引物设计应注意如下要点：
1 引物的长度一般为15-30 bp，常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA 聚合酶进行反应。

2 引物序列在模板内应当没有相似性较高，尤其 ...

呵呵，primer5，我也是才下载的，刚刚开始使用。