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llzhang2012

[交流] 克隆基因全长引物设计问题已有9人参与

已知一序列全长,如何根据此序列设计引物克隆出全长,我是新手,麻烦各位详细介绍一下设计全长引物的步骤,最近实验急需,非常感谢!!!
  我以前克隆过片段,没有做过全长,引物设计的一些基本原则都已了解,但是设计全长引物一点都不懂,劳烦各位,谢谢!
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 陈思容 at 2009-11-6 16:51:



    也就是说我P的时候要用高保真的,能加A尾的酶,对吧?我的载体是promega公司的pGEM-T easy vector,可以直接测序的!我只测序,不做表达的!

对。你的T载体如果自身带酶切位点的话就可以不用设计酶切位点,用载体上的酶切位点了。
14楼2009-11-06 16:53:29
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xiangao

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
从ATG开始设计上游引物   TAA处设计下游引物
3楼2009-11-04 16:22:43
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小白3521

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物上要加酶切位点和保护碱基
4楼2009-11-04 17:02:39
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llzhang2012

引用回帖:
Originally posted by 小白3521 at 2009-11-4 17:02:
引物上要加酶切位点和保护碱基

具体要怎样加啊?
5楼2009-11-05 15:31:25
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