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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】比色法测多糖
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ay45

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】比色法测多糖

现在做多糖的检测，最近发现同一样品同一浓度，苯酚-硫酸法显色不一样。可见光检测其吸光值，有差别，而且不小的差别呢。百思不得其解，自己操作都一样呀，但是就是测的不好。  谁能告诉我呀！！！交流下呀……很是郁闷，希望大家指点下呀！！很是感激！！！
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1楼 2009-11-03 20:34:40
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wan_qin520

铜虫 (初入文坛)
★
ay45(金币+1):谢谢参与
可能你的样品本身就有旋光性，而且可能一直随着时间在变
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2楼2009-11-03 20:38:06
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ay45

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wan_qin520 at 2009-11-3 20:38:
可能你的样品本身就有旋光性，而且可能一直随着时间在变

但是检测的时候  吸光值挺稳定的啊
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3楼2009-11-03 20:54:37
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wangxinlnu

银虫 (小有名气)
★
ay45(金币+1):谢谢参与
反应条件的控制不平行，我直接在室温条件下做的，把硫酸加入到多糖中，反应剧烈，温度很高，反应较完全，
可采用同一批试剂多做几个样品，摸摸条件
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成功四要素：自己要行；要有人说你行；说你行的人要行；身体要行
4楼2009-11-03 21:05:56
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ay45

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wangxinlnu at 2009-11-3 21:05:
反应条件的控制不平行，我直接在室温条件下做的，把硫酸加入到多糖中，反应剧烈，温度很高，反应较完全，
可采用同一批试剂多做几个样品，摸摸条件

这样啊  但是我在加入浓硫酸后，感觉颜色有点不一样，最后测出来的真的不一样……那我应该是要用样品来摸条件吧。 对了，你的都不加热的么，直接加完浓硫酸，冷却到室温时直接测量么？   呵呵
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5楼2009-11-04 01:30:54
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wangxinlnu

银虫 (小有名气)
★
ay45(金币+1,VIP+0): 11-5 00:12
我采用此法做多糖的含量测定，用葡萄糖做标准曲线，6%苯酚1ml左右，浓硫酸7ml，在25ml容量瓶中先加入糖，苯酚，水（以上三个总体积3ml），然后用移液管加入7ml硫酸，瓶口别对着自己，（反应总体积10ml），加完后摇摇，放置30-40min，测试
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6楼2009-11-04 18:27:55
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wangxinlnu

银虫 (小有名气)
测定多糖时，多糖的浓度要摸索，使吸光度在0.3-0.7之间
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7楼2009-11-04 18:30:09
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ay45

金虫 (小有名气)
[quote]Originally posted by wangxinlnu at 2009-11-4 18:30:
测定多糖时，多糖的浓度要摸索，使吸光度在0.3-0.7之间 [/quote

这个我倒是做到了，每次的浓度都差不多，吸光值也在这个范围。
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8楼2009-11-05 00:12:16
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