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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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ay45

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】比色法测多糖

现在做多糖的检测,最近发现同一样品同一浓度,苯酚-硫酸法显色不一样。可见光检测其吸光值,有差别,而且不小的差别呢。百思不得其解,自己操作都一样呀,但是就是测的不好。  谁能告诉我呀!!!交流下呀……很是郁闷,希望大家指点下呀!!很是感激!!!
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wan_qin520

铜虫 (初入文坛)


ay45(金币+1):谢谢参与
可能你的样品本身就有旋光性,而且可能一直随着时间在变
2楼2009-11-03 20:38:06
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ay45

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wan_qin520 at 2009-11-3 20:38:
可能你的样品本身就有旋光性,而且可能一直随着时间在变

但是检测的时候  吸光值挺稳定的啊
3楼2009-11-03 20:54:37
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wangxinlnu

银虫 (小有名气)


ay45(金币+1):谢谢参与
反应条件的控制不平行,我直接在室温条件下做的,把硫酸加入到多糖中,反应剧烈,温度很高,反应较完全,
可采用同一批试剂多做几个样品,摸摸条件
成功四要素:自己要行;要有人说你行;说你行的人要行;身体要行
4楼2009-11-03 21:05:56
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ay45

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wangxinlnu at 2009-11-3 21:05:
反应条件的控制不平行,我直接在室温条件下做的,把硫酸加入到多糖中,反应剧烈,温度很高,反应较完全,
可采用同一批试剂多做几个样品,摸摸条件

这样啊  但是我在加入浓硫酸后,感觉颜色有点不一样,最后测出来的真的不一样……那我应该是要用样品来摸条件吧。 对了,你的都不加热的么,直接加完浓硫酸,冷却到室温时直接测量么?   呵呵
5楼2009-11-04 01:30:54
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wangxinlnu

银虫 (小有名气)


ay45(金币+1,VIP+0): 11-5 00:12
我采用此法做多糖的含量测定,用葡萄糖做标准曲线,6%苯酚1ml左右,浓硫酸7ml,在25ml容量瓶中先加入糖,苯酚,水(以上三个总体积3ml),然后用移液管加入7ml硫酸,瓶口别对着自己,(反应总体积10ml),加完后摇摇,放置30-40min,测试
成功四要素:自己要行;要有人说你行;说你行的人要行;身体要行
6楼2009-11-04 18:27:55
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wangxinlnu

银虫 (小有名气)

测定多糖时,多糖的浓度要摸索,使吸光度在0.3-0.7之间
成功四要素:自己要行;要有人说你行;说你行的人要行;身体要行
7楼2009-11-04 18:30:09
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ay45

金虫 (小有名气)

[quote]Originally posted by wangxinlnu at 2009-11-4 18:30:
测定多糖时,多糖的浓度要摸索,使吸光度在0.3-0.7之间 [/quote

这个我倒是做到了,每次的浓度都差不多,吸光值也在这个范围。
8楼2009-11-05 00:12:16
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