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fanxing001铜虫 (小有名气)
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[交流]
寻求我的PCR反应不稳定的原因
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各位，最近做PCR有些不顺利，用同样的东西，总是有时候P出来，有时候P出不来。我用的体系是25微升的，具体为：ddH2O 17.5，10*buffer 2.5，dNTP 2，F引物0.5， R引物0.5，rTaq酶0.125，模板是2微升的口腔细菌基因组DNA。我用的引物是细菌16S rDNA通用引物，口腔细菌基因组DNA是用“细菌基因组DNA提取试剂盒”提的，就是用无菌棉签刮几下口腔内壁，然后用试剂盒提。我怀疑是不是模板的浓度太低啊，因为我的marker每条带约是50ng的DNA，而成功P出来的时候，目的产物估计最多的也就100ng（如图）。各位帮俺看看是啥毛病导致我的PCR反应如此不稳定的吧，多谢！ [ Last edited by amisking on 2009-11-2 at 08:39 ] |
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