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【求助】FITC 的标记
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| 大家好。我想问一下关于FITC 标记氨基酸的具体的实验步骤？谢谢啊！急 急 急！ |
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3楼2009-10-31 22:38:00
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
chemistryer(金币+2,VIP+0):鼓励详细应助 11-1 19:18
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碱性磷酸酶（AP）标记 碱性磷酸酶（AP）用于标记抗体，常用戊二醛一步法，将酶和单抗混合，再加入适量戊二醛，使酶和抗体蛋白的NH2分别与两个醛基结合，制备成结合物。该法简便，但所得产物不均一，抗体活性损失大，酶标记率低。其程序如下： （1）将5mg AP加入1ml抗体溶液（2mg/ml）中溶解，装入透析袋，于4℃对0.01mol/L PH7.2 PBS透析18小时，换液三次。 （2）加入2.5%戊二醛20ul，室温作用1-2小时，4℃对PBS透析过夜，其间换液三次。 （3）换用0.05mol/L PH8.0 Tris-HCl缓冲液透析，4℃过夜，换液三次。 （4）取出标记抗体，用含1%BSA的Tris-HCl缓冲液稀释至4ml，即为AP标记物原液。 （5）每毫升中加入0.4ml甘油，小量分装，保存备用。 给你参考把 |
2楼2009-10-31 22:09:51
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