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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 大肠杆菌高密度发酵
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忘川ymn

新虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌高密度发酵 已有2人参与

最近做大肠杆菌高密度发酵，底糖30g/L左右，前期正常生长，底糖耗完OD20左右，溶氧反弹，开始补料（流加葡萄糖），然后OD就不变了，一直维持在20左右，请问是什么原因呢，是乙酸抑制了嘛
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1楼 2025-02-06 12:43:50
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草木贲华

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 学术大菜菜 at 2025-06-08 22:09:44
你好，请问我的补料配方为100g/L甘油+100g/L酵母提取物，发酵到30小时后OD也基本不涨了，维持在30左右是碳氮比的问题吗？...

30 h基本也是大肠杆菌发酵极限了，再之后不长了很正常。30几就有点太低了，具体看是什么菌株，BL21的话一般能长到100以上，DH5α也能达到80左右。只有30几基本是培养基或者发酵条件不合适。当然如果是质粒发酵要限制菌株生长速度的话又另当别论，不过质粒发酵30个小时又太久了，你的菌株生长速度一直这么慢吗？还是到了某个OD或者时间以后突然很慢？
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11楼2025-06-09 15:46:43
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草木贲华

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

补料只有葡萄糖？没有N源吗？没有N源也是不长的
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2楼2025-02-18 22:29:19
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Liucj123

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

发酵罐  要有搅拌装置、温度监控、溶解氧监控、pH监控。   pH文献比较多说是使用磷酸盐缓冲液 0.2M  6.8-7.2   控制发酵条件、温度37℃，搅拌转速根据溶氧情况调整(一般初始为300-500rpm)，通气量维持溶氧在30%-50%饱和度   N源可以选择酵母提取物
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3楼2025-02-19 15:55:02
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忘川ymn

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 草木贲华 at 2025-02-18 22:29:19
补料只有葡萄糖？没有N源吗？没有N源也是不长的

培养基有酵母粉，氯化铵，ph用氨水调，应该不会缺氮吧
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4楼2025-02-25 09:24:03
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