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忘川ymn

新虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌高密度发酵已有2人参与

最近做大肠杆菌高密度发酵,底糖30g/L左右,前期正常生长,底糖耗完OD20左右,溶氧反弹,开始补料(流加葡萄糖),然后OD就不变了,一直维持在20左右,请问是什么原因呢,是乙酸抑制了嘛
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草木贲华

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 学术大菜菜 at 2025-06-08 22:09:44
你好,请问我的补料配方为100g/L甘油+100g/L酵母提取物,发酵到30小时后OD也基本不涨了,维持在30左右是碳氮比的问题吗?...

30 h基本也是大肠杆菌发酵极限了,再之后不长了很正常。30几就有点太低了,具体看是什么菌株,BL21的话一般能长到100以上,DH5α也能达到80左右。只有30几基本是培养基或者发酵条件不合适。当然如果是质粒发酵要限制菌株生长速度的话又另当别论,不过质粒发酵30个小时又太久了,你的菌株生长速度一直这么慢吗?还是到了某个OD或者时间以后突然很慢?
11楼2025-06-09 15:46:43
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草木贲华

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

补料只有葡萄糖?没有N源吗?没有N源也是不长的
2楼2025-02-18 22:29:19
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Liucj123

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

发酵罐  要有搅拌装置、温度监控、溶解氧监控、pH监控。   pH文献比较多说是使用磷酸盐缓冲液 0.2M  6.8-7.2   控制发酵条件、温度37℃,搅拌转速根据溶氧情况调整(一般初始为300-500rpm),通气量维持溶氧在30%-50%饱和度   N源可以选择酵母提取物
3楼2025-02-19 15:55:02
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忘川ymn

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 草木贲华 at 2025-02-18 22:29:19
补料只有葡萄糖?没有N源吗?没有N源也是不长的

培养基有酵母粉,氯化铵,ph用氨水调,应该不会缺氮吧
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4楼2025-02-25 09:24:03
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