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柏拉图的理想

金虫 (初入文坛)

[求助] qPCR扩不出来

我从文献里找到对应功能基因的引物,送去公司构建质粒,电泳结果也是跑得出来的,但是一做qPCR就没任何结果,这是什么原因呢?(站内没法发图片,图片我放到网盘里)

图1,是公司跑电泳的结果,感觉没什么问题
图2,是扩增曲线,只有标线的部分才出现曲线,其他待测样品部分并没有出现曲线
图3,是熔解曲线
图4,是Ct结果部分,绿色的部分是我标线的地方,边框加粗的部分是我的待测样品

我本以为是样品中浓度过低,需要增加循环数才行,但我从40个循环增加到60个循环也是这个样子,现在我已经不知道要怎么进一步处理了,难道是我引物和我的样品情况不匹配吗?如果是,那为什么电泳的部分能够跑出条带来?

文件链接
链接:https://pan.baidu.com/s/1ij6Ac4oYdu9OcR6-HUOF1Q
提取码: xijb
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