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MDCK培养问题
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一直在养MDCK细胞,但是老是出现问题,主要是消化不好的问题,刚开始时是用PBS洗两次后,胰酶加EDTA消化4-6min,然后直接用消化液吹下来后再加培养基DMEM去吹散, 现在的做法是用预热的消化液(胰酶加EDTA)去洗两次,每次约1min,然后加消化液37度孵育2min左右,弃消化液换培养基吹下来,再吹散。 主要问题是:第一种方法,细胞吹下来后容易成小团,吹不成单个,吹过度后第二天全漂了 第二种方法此问题也出现,而且不容易吹下来。 另,细胞传稀了,长了两天后,换个液,第二天细胞变圆了,也漂了。 困惑死了,细胞时好时坏,实验没法按时进行,养得自己快崩溃了,大部分人都说这个细胞很贱很容易养,少部分人说这个细胞很娇贵。唉,希望高手能指点迷津,谢谢了!!! |
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