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MDCK培养问题
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一直在养MDCK细胞，但是老是出现问题，主要是消化不好的问题，刚开始时是用PBS洗两次后，胰酶加EDTA消化4-6min,然后直接用消化液吹下来后再加培养基DMEM去吹散， 现在的做法是用预热的消化液（胰酶加EDTA）去洗两次，每次约1min，然后加消化液37度孵育2min左右，弃消化液换培养基吹下来，再吹散。 主要问题是：第一种方法，细胞吹下来后容易成小团，吹不成单个，吹过度后第二天全漂了 第二种方法此问题也出现，而且不容易吹下来。 另，细胞传稀了，长了两天后，换个液，第二天细胞变圆了，也漂了。 困惑死了，细胞时好时坏，实验没法按时进行，养得自己快崩溃了，大部分人都说这个细胞很贱很容易养，少部分人说这个细胞很娇贵。唉，希望高手能指点迷津，谢谢了！！！ |
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