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lvjc9988

新虫 (初入文坛)

[求助] 苯酚硫酸法测粗多糖

我们用的苯酚硫酸法:
1.样品处理:取均匀的待测样品2.0g,置于100ml容量瓶中,加水80ml左右,于沸水浴上加热2h,冷却至室温后补加水至刻度,混匀后,过滤,弃去初滤液,收集续滤液供沉淀多糖。
2.沉淀粗多糖:准确吸取上一步续滤液5.0ml,置于50ml离心管中,加入污水乙醇20ml,混匀5min后,以3000r/min离心5min,弃去上清液。残渣用80%(体积分数)乙醇溶液数毫升洗涤,离心后弃去上清夜,反复操作3-4次。残渣用水溶解并定容至5.0ml,混匀后,供沉淀葡聚糖。
3.沉淀葡聚糖:准确吸取第2步终溶液2ml,置于20ml离心管中,加入100g/L氢氧化钠溶液2.0ml、铜试剂溶液2.0ml,沸水浴中煮沸2min,冷却,以3000r/min离心5min,弃去上清液。残渣用洗涤液数毫升洗涤,离心后弃去上清液,反复操作3次,残渣用10%(体积分数)硫酸溶液2.0ml溶解并转移至50ml容量瓶中,加水稀释至刻度,混匀,此液为样品测定液体。
  我们检测时沉淀粗多糖一步中有较多沉淀,但在沉淀葡聚糖步骤中,离心后很少有沉淀。请各位老师指导一下,是方法有问题还是操作有问题呢,万分感谢!
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Hongjinhai

铁虫 (小有名气)

感觉你测的方法有很大问题,样品是不是含有还原性糖?
2楼2025-02-11 17:32:49
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