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lvjc9988

新虫 (初入文坛)

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虫号: 35766709
注册: 2024-11-18
性别: GG
专业: 运动调节与运动障碍

[求助] 苯酚硫酸法测粗多糖

我们用的苯酚硫酸法：
1.样品处理：取均匀的待测样品2.0g，置于100ml容量瓶中，加水80ml左右，于沸水浴上加热2h，冷却至室温后补加水至刻度，混匀后，过滤，弃去初滤液，收集续滤液供沉淀多糖。
2.沉淀粗多糖：准确吸取上一步续滤液5.0ml，置于50ml离心管中，加入污水乙醇20ml，混匀5min后，以3000r/min离心5min，弃去上清液。残渣用80%（体积分数）乙醇溶液数毫升洗涤，离心后弃去上清夜，反复操作3-4次。残渣用水溶解并定容至5.0ml，混匀后，供沉淀葡聚糖。
3.沉淀葡聚糖：准确吸取第2步终溶液2ml，置于20ml离心管中，加入100g/L氢氧化钠溶液2.0ml、铜试剂溶液2.0ml，沸水浴中煮沸2min，冷却，以3000r/min离心5min，弃去上清液。残渣用洗涤液数毫升洗涤，离心后弃去上清液，反复操作3次，残渣用10%（体积分数）硫酸溶液2.0ml溶解并转移至50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，此液为样品测定液体。
我们检测时沉淀粗多糖一步中有较多沉淀，但在沉淀葡聚糖步骤中，离心后很少有沉淀。请各位老师指导一下，是方法有问题还是操作有问题呢，万分感谢！

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