应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR酶的选择
121/2返回列表12下一页
查看: 893  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

陈思容

铜虫 (正式写手)

[交流] PCR酶的选择

各位，
    最近要做PCR,P完后与T载体连接，送出去测序，请问用什么酶比较好，有人告诉我高保真的TAQDNA聚合酶不能加A尾，但我们实验室的载体就是T-A连接的；
   还有一个问题，我后面要P一个接近7000bp的基因，请问要选什么酶和载体，一般的载体和酶上限就是3000bp了！
   不甚感激！！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-10-29 10:26:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

message

铁虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1,VIP+0): 10-29 13:11
可以用高保真的KOD酶或Pfu酶，但是需要加A
赞一下(7人) 回复此楼
2楼2009-10-29 10:35:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gastrodia

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1,VIP+0): 10-29 13:11
你买个平端的载体，用pFU，7kb没问题的
赞一下(7人) 回复此楼
3楼2009-10-29 10:57:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gxsulong

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
LA Taq 就可以了，P出来有A.
赞一下(1人) 回复此楼
霉菌
4楼2009-10-29 10:57:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peng5053

银虫 (正式写手)

Dr.
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2,VIP+0): 10-29 13:11
3楼说的很好，可以直接选用LA TAQ,这个酶有末端转移酶活性，能加A，同时这个酶在扩增长片段时，特别是3Kb以上的片段时具有很高的保证性！你可以试下
赞一下(7人) 回复此楼
多点思维，多点idea
5楼2009-10-29 11:23:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)
谢谢各位！
回复此楼
6楼2009-10-29 14:09:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by gastrodia at 2009-10-29 10:57:
你买个平端的载体，用pFU，7kb没问题的

非常感谢，一般长度的基因的话选用什么酶比较好呢，要求高保真性，还能加A尾
赞一下 回复此楼
7楼2009-10-29 14:13:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

humants

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by peng5053 at 2009-10-29 11:23:
3楼说的很好，可以直接选用LA TAQ,这个酶有末端转移酶活性，能加A，同时这个酶在扩增长片段时，特别是3Kb以上的片段时具有很高的保证性！你可以试下

请问我的目的基因有1kb用LA Taq，能达到高保真吗？我要求做出来测定酶活力。
赞一下 回复此楼
8楼2009-10-29 16:32:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

superyuanjia

至尊木虫 (著名写手)
ex-taq
回复此楼
9楼2009-10-29 17:20:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smurfen

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by humants at 2009-10-29 16:32:



请问我的目的基因有1kb用LA Taq，能达到高保真吗？我要求做出来测定酶活力。

1kb一般都不会突变吧
要测taq酶的活力吗？
赞一下 回复此楼
Advances in Prevention of Thermal Runaway in Lithium-Ion Batteries
10楼2009-10-29 17:22:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 陈思容 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 291 求调剂 +4 化工2026届毕业� 2026-03-21 4/200 2026-03-23 09:59 by bingchuan
[考研] 0703 调剂 +3 我可以上岸的对� 2026-03-16 6/300 2026-03-23 08:52 by 醉在风里
[考研] 352求调剂 +3 大米饭！ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123！
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 4/200 2026-03-22 11:04 by 搏击518
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂 +11 吃吃吃才有意义 2026-03-19 11/550 2026-03-21 18:23 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 二本跨考郑大材料306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:29 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +9 手机用户 2026-03-17 9/450 2026-03-20 14:24 by 无懈可击111
[考研] 一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭