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Crispr敲除拟南芥能在Basta筛选下长出来但是靶点未被编辑
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遇到的问题如题 使用的拟南芥是一个OE株系（Hyg抗性），一个双突株系（无抗性），在这两个基础上分别转入带Basta抗性的crispr质粒敲除基因。crispr质粒是刘耀光院士实验室的PYLCRISPR/Cas9 Pubi-B质粒。通过浸花法得到的种子差不多每一两万颗出一颗能在Basta筛选下生长的阳性苗。跑设计在靶点附近上下游300bp引物获得的PCR产物经过测序发现靶点未被编辑。同时再用Basta筛选下生长的阳性苗提的DNA去跑Cas9-F/R，有很弱的条带，如图（将Cas9-F/R引物输入UB质粒图谱，对应产物大小为572bp） 请问我该如何解决靶点未被编辑的这个问题 |
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